全血における連続トロンビン生成：凝固の活性化因子と阻害剤を評価するための新しい用途

止血検査は、血液凝固の可能性を明らかにするために利用されています。この研究の新規トロンビン生成（TG）アッセイは、明示的な情報を提供し、生体内で最も生理的に関連する止血試験です。多くの関連する状況下で、このアッセイがTGをどのように許可するかを説明します。第一に、健康な人の全血（WB）を分析した±5 pm組織因子（TF）および±接触経路阻害を分析しました。外因性イニシエーターなしでは、TGは減少して遅延しましたが、午後5時のTFを添加してラグ相が短くなり、ピークトロンビンが増加しました。追加の実験には、内因性活動について分析された外傷患者からの新鮮なWBと、TG拮抗薬を服用した健康なドナーからのTGが含まれていました。最後に、血小板貧しい血漿を詰めた赤血球で再構成し、TGを活性化因子としてのTFとリン脂質表面としてのPCPの両方の存在下と非存在下で監視しました。私たちのデータは、この連続TGアッセイが、血液凝固に関連する障害の評価と、これらの障害に応じて投与された治療のモニタリングにおいて存在する可能性を示しています。

Hemostatic tests have been utilized to clarify the blood coagulation potential. The novel thrombin generation (TG) assay of this study provides explicit information and is the most physiologically-relevant hemostatic test ex vivo. We describe how this assay allows for TG under a number of relevant circumstances. First, whole blood (WB) from healthy individuals was analyzed ± 5 pM tissue factor (TF) and ± contact pathway inhibition. Without an exogenous initiator TG was decreased and delayed, but addition of 5 pM TF shortened the lag phase and increased peak thrombin. Additional experiments included fresh WB from a trauma patient analyzed for endogenous activity and TG from healthy donors subjected to TG antagonists which prolonged the lag phase whereas TG agonists consistently shortened the lag phase in a dose dependent manner. Lastly, platelet-poor plasma was reconstituted with packed red blood cells and TG was monitored in the presence and absence of both TF as an activator and PCPS as a phospholipid surface. Our data illustrate the potential that this continuous TG assay has in the evaluation of disorders relevant to blood coagulation and in the monitoring of treatments administered in response to these disorders.