マウス漿液性キャビティマクロファージの分離と同定

白血球抽出のアクセシビリティと容易さにより、腹膜腔は、in vitro分析のために一次マクロファージを取得し、炎症をモデル化するために最も一般的に使用される部位の1つになりました。しかし、マルチパラメーターフローサイトメトリーの出現により、マクロファージ、樹状細胞、および他の白血球と共存する単球の複数の集団を含む漿液性空洞の単核咽細胞区画の複雑さが強調されています。漿液性キャビティマクロファージは、組織の恒常性の維持と炎症の生成と解像度の両方に寄与することが知られていることを考えると、腹膜マクロファージコンパートメントを構成する細胞の完全な理解、関連する単核ファ節細胞からそれらを識別する方法、およびそれらを除外するために必要な場合に必要なプロセスが存在します。ここでは、一般的に使用されている方法を詳細に、腹膜および胸膜から白血球を分離し、これらの部位の単核食細胞の個別の集団を特定するための信頼できる戦略を説明します。

Accessibility and ease of leukocyte extraction led to the peritoneal cavity becoming one of the most commonly used sites to obtain primary macrophages for in vitro analyses and to model inflammation. However, the advent of multiparameter flow cytometry has highlighted the complexity of the mononuclear phagocyte compartment of the serous cavities, which contains multiple populations of macrophages, dendritic cells, and monocytes that coexist with other leukocytes. Given that serous cavity macrophages are known to contribute to both the maintenance of tissue homeostasis and the generation and resolution of inflammation, a thorough understanding of the cells that comprise the peritoneal macrophage compartment, how to identify them from related mononuclear phagocytes, and the processes required to isolate them for ex vivo and in vitro analysis is important if we are to fully understand their function in different tissue contexts. Here, we detail commonly used methods to isolate leukocytes from the peritoneal and pleural cavities and describe reliable strategies to identify the discrete populations of mononuclear phagocytes in these sites.