液体クロマトグラフィータンデム質量分析を使用して、プラズマにおけるフェンタニル、スフェンタニル、セファゾリン、ドキサプラム、ケトドキサプラムの同時定量化

シンプルかつ特定のUPLC-MS/MSメソッドが開発され、フェンタニル、スフェンタニル、セファゾリン、ドキサプラム、およびその活性代謝産物ケトドキサプラムの同時定量化のために検証されました。内部標準は、すべての分析物に対してフェンタニル-D5でした。クロマトグラフィー分離は、注入されたサンプルあたりわずか5.0分の実行時間を備えた逆相蓄積UPLC HSS T3カラムで達成されました。勾配溶出は、Milli-Qの超純水またはメタノール中の総流量0.4 mL Min-1のメタノール中の酢酸アンモニウムまたは形成酸からなる移動相で行われました。適切な精度と精度を達成するには、わずか50μLのプラズマ量が必要でした。5つの分析物すべてのキャリブレーション曲線は線形でした。すべての分析物は、オートサンプラーで少なくとも48時間安定していました。この方法は、米国食品医薬品局のガイドラインに従って検証されました。この方法により、フェンタニル、スフェンタニル、セファゾリン、ドキサプラム、ケトドキサプラムの定量化が可能になります。この方法の強度は、少量のサンプル量、短い実行時間、重水素化された内部標準、簡単なサンプル調製方法、および1回の実行ですべての分析物を同時に定量化する能力の組み合わせです。

A simple and specific UPLC-MS/MS method was developed and validated for simultaneous quantification of fentanyl, sufentanil, cefazolin, doxapram and its active metabolite keto-doxapram. The internal standard was fentanyl-d5 for all analytes. Chromatographic separation was achieved with a reversed-phase Acquity UPLC HSS T3 column with a run-time of only 5.0 min per injected sample. Gradient elution was performed with a mobile phase consisting of ammonium acetate or formic acid in Milli-Q ultrapure water or in methanol with a total flow rate of 0.4 mL min-1 . A plasma volume of only 50 μL was required to achieve adequate accuracy and precision. Calibration curves of all five analytes were linear. All analytes were stable for at least 48 h in the autosampler. The method was validated according to US Food and Drug Administration guidelines. This method allows quantification of fentanyl, sufentanil, cefazolin, doxapram and keto-doxapram, which is useful for research as well as therapeutic drug monitoring, if applicable. The strength of this method is the combination of a small sample volume, a short run-time, a deuterated internal standard, an easy sample preparation method and the ability to simultaneously quantify all analytes in one run.