ベンゾジアゼピンはヒト血小板活性化を阻害します：フルラゼパムとジアゼパムの抗血小板作用のメカニズムの比較

これらの研究は、ヒトの血小板活性化に対するフルラゼパムとジアゼパムの効果と作用機序を調べるために行われました。フルラゼパム (3 ～ 300 マイクロ M) またはジアゼパム (3 ～ 300 マイクロ M) と 1 分間プレインキュベーションすると、ADP (1 ～ 5 マイクロ M)、エピネフリン (1 ～ 5 マイクロ M)、およびアラキドン酸によって誘導される血小板凝集、セロトニン分泌およびプロスタグランジン合成が阻害されました (600-1000μM）。しかし、アラキドン酸誘導によるマロンジアルデヒド（MDA）の生成を50％阻害するには、フルラゼパム（58μM）と比較して357％高い濃度のジアゼパム（265μM）が必要であった。さらに、ジアゼパムではなくフルラゼパムは、濃度依存的に血小板リン脂質からのアラキドン酸の放出を阻害した。他の実験では、フルラゼパムは、プロスタグランジン H2 の安定な類似体である U46619 (2 microM) によって誘導される凝集と分泌もブロックしましたが、ジアゼパムはブロックしませんでした。コラーゲン（40～300マイクログラム/ml）によって誘導される血小板凝集とセロトニン分泌は、フルラゼパムによってそれぞれ153マイクロMと136マイクロMのIC-50で阻害されたが、コラーゲン誘導性の凝集と分泌を阻害するには300マイクロMを超えるジアゼパムが必要であった。50%。フルラゼパムとジアゼパムは両方とも、プロスタグランジン非依存性機構によって媒介されるホスホリパーゼ C 誘発凝集に対して最も強力な抗血小板効果を示しました。PLC誘導性の凝集とセロトニンの分泌をそれぞれ50%阻害するには、わずか15μMと11μMのフルラゼパム、および31μMと27μMのジアゼパムが必要でした。血小板サイクリックAMPおよびサイクリックGMPに対するこれらのベンゾジアゼピンの影響も調べました。フルラゼパムもジアゼパムも、血小板のサイクリック AMP またはサイクリック GMP レベルに大きな変化を引き起こしませんでした。これらの発見は、(a) フルラゼパムは、ジアゼパムと比較して、アラキドン酸、コラーゲン、ホスホリパーゼ C によって誘発される血小板凝集とセロトニン分泌の阻害において 106% ～ 357% 効果的であることを示唆しています。(b) フルラゼパムは、アラキドン酸の放出、プロスタグランジンへの変換を阻害し、血小板に対するプロスタグランジンの作用をブロックすることにより、血小板の活性化を阻害します。(c) ジアゼパムは、トロンビンによるアラキドン酸の放出、外因的に添加されたアラキドン酸の MDA への変換、またはプロスタグランジンの作用を阻害しません。(d) フルラゼパムとジアゼパムは両方とも、PLC を介した血小板の活性化を阻害します。(e) ジアゼパムもフルラゼパムも、血小板環状ヌクレオチドレベルに影響を与えることによって抗血小板作用を達成しない。

These studies were undertaken to examine the effects and the mechanism of action of flurazepam and diazepam on human platelet activation. One minute preincubation with flurazepam (3-300 microM) or diazepam (3-300 microM) inhibited platelet aggregation, serotonin secretion and prostaglandin synthesis induced by ADP (1-5 microM), epinephrine (1-5 microM), and arachidonic acid (600-1000 microM). However, 357% higher concentration of diazepam (265 microM) as compared to flurazepam (58 microM), was required to inhibit arachidonic acid induced production of malondialdehyde (MDA) by 50%. In addition, flurazepam and not diazepam inhibited the release of arachidonic acid from platelet phospholipids in a concentration dependent manner. In other experiments flurazepam but not diazepam also blocked aggregation and secretion induced by U46619 (2 microM), a stable analog of prostaglandin H2. Platelet aggregation and serotonin secretion induced by collagen (40-300 micrograms/ml) was inhibited by flurazepam with an IC-50 of 153 microM and 136 microM respectively, whereas higher than 300 microM diazepam was required to inhibit collagen-induced aggregation and secretion by 50%. Flurazepam and diazepam both exhibited their most potent antiplatelet effects against phospholipase C-induced aggregation which is mediated by prostaglandin-independent mechanisms. Only 15 microM and 11 microM flurazepam and 31 microM and 27 microM diazepam were needed to inhibit PLC-induced aggregation and secretion of serotonin by 50% respectively. Effects of these benzodiazepines on platelet cyclic AMP and cyclic GMP were also examined. Neither flurazepam nor diazepam caused any significant change in cyclic AMP or cyclic GMP levels in platelets. These findings suggest that: (a) flurazepam, as compared to diazepam, is 106% - 357% more effective in inhibiting platelet aggregation and serotonin secretion induced by arachidonic acid, collagen and phospholipase C; (b) flurazepam inhibits platelet activation by inhibiting the release of arachidonic acid, its conversion into prostaglandins and by blocking the action of prostaglandins on platelets; (c) diazepam does not inhibit thrombin-induced release of arachidonic acid, conversion of exogenously added arachidonic acid into MDA, or the action of prostaglandins; (d) both flurazepam and diazepam inhibit PLC-mediated activation of platelets; and (e) neither diazepam nor flurazepam achieve their antiplatelet actions by affecting platelet cyclic nucleotide levels.