酵母Saccharomyces cerevisiaeにおける大腸菌の句遺伝子の発現

大腸菌由来の光再活性化遺伝子ｐｈｒ１を含む２ｋｂのＤＮＡ断片を、酵母Ｅ．のｔｅｔ遺伝子のＢａｍＨ１部位に挿入した。大腸菌シャトルベクターpJDB207。光再活性化 - このプラスミドで形質転換された欠損サッカロミセス・セレビシエ細胞は、細胞のUV照射後に光再活性化による死滅を示し、一方形質転換細胞の抽出物はin vitroで光再活性化活性を示した。遺伝子がtet遺伝子と反対の方向でプラスミドに挿入された場合、同じ方向で挿入された遺伝子を有するプラスミドと比較して、はるかに多くの光再活性化酵素分子が見出された。大腸菌phr1遺伝子によりコードされ、形質転換酵母細胞内で産生される光回復酵素は、光回復活性に対するイオン強度の影響から大腸菌光回復酵素（フラボタンパク質）の特徴を有している。

A 2 kb DNA fragment, containing the photoreactivation gene phr1 from Escherichia coli, was inserted at the BamH1 site in the tet gene of the yeast--E. coli shuttle vector pJDB207. Photoreactivation--deficient Saccharomyces cerevisiae cells transformed with this plasmid showed photoreactivation of killing after UV irradiation of the cells, while extracts of transformed cells exhibited photoreactivating activity in vitro. Far more photoreactivating enzyme molecules were found when the gene was inserted in the plasmid in the opposite orientation to the tet gene as compared with a plasmid carrying the inserted gene in the same orientation. Photoreactivating enzyme encoded by the E. coli phr1 gene and produced in transformed yeast cells has characteristics of the E. coli photoreactivating enzyme (flavoprotein) as judged from the influence of ionic strength on photoreactivating activity.