グリカンマイクロアレイ用の酸化アルミニウム製ガラススライドの調製

この研究では、グリカンマイクロアレイの調製のために、酸化アルミニウムコーティングガラス（ACG）スライドの製造を報告します。純粋なアルミニウム（AL、300 nM）をガラススライド上で電子蒸気蒸着重合（VDP）を介してコーティングし、その後陽極酸化を行い、表面に酸化アルミニウム（Al-酸化アルミニウム）を形成しました。この方法で準備されたACGスライドは、制御された密度と空間距離を備えたホスホネート形成を介して共有糖を共有するための滑らかな表面を提供します。このアレイシステムを評価するために、α-5-ペンチルホスホン酸のマンノース誘導体を、蛍光プローブA488とタグ付けしたコンカナバリンA（cona）と相互作用する表面マンノースの蛍光応答に基づいて、共有結合アレイの最適化のモデルとして使用されました。ACGスライドは、走査型電子顕微鏡、原子間力顕微鏡（AFM）、およびエリプソメトリーを使用して特徴付けられ、糖負荷能力、均一性、および構造立体構造も、AFM、GenePixスキャナー、および共焦点顕微鏡を使用して特徴付けられました。この研究では、ACGスライドから調製されたグリカンアレイは、N-ヒドロキシシジミド活性化ガラススライドから調製された一般的に使用されるグリカンアレイと比較して、より良い空間制御により均一であることが実証されています。

In this study, we report the fabrication of aluminum oxide-coated glass (ACG) slides for the preparation of glycan microarrays. Pure aluminum (Al, 300 nm) was coated on glass slides via electron-beam vapor deposition polymerization (VDP), followed by anodization to form a thin layer (50-65 nm) of aluminum oxide (Al-oxide) on the surface. The ACG slides prepared this way provide a smooth surface for arraying sugars covalently via phosphonate formation with controlled density and spatial distance. To evaluate this array system, a mannose derivative of α-5-pentylphosphonic acid was used as a model for the optimization of covalent arraying based on the fluorescence response of the surface mannose interacting with concanavalin A (ConA) tagged with the fluorescence probe A488. The ACG slide was characterized using scanning electron microscopy, atomic force microscopy (AFM), and ellipsometry, and the sugar loading capacity, uniformity, and structural conformation were also characterized using AFM, a GenePix scanner, and a confocal microscope. This study has demonstrated that the glycan array prepared from the ACG slide is more homogeneous with better spatial control compared with the commonly used glycan array prepared from the N-hydroxysuccinimide-activated glass slide.