カナマイシンに対する耐性を付与する細菌ベクター

プラスミドPLD720（COSMIDベクターPHC79の欠失誘導体）のベースでは、大腸菌細胞に付与する多数のハイブリッドプラスミドがカナマイシン耐性を構築しました。すべてのハイブリッドプラスミドには、トランスポゾンTN5からのカナマイシン抵抗性遺伝子（アミノグリコシド3'-ホスホトランスフェラーゼIIをコードする）のプロモーターのない部分が含まれています。KM遺伝子発現は、PLD720に位置するプロモーターによって駆動されます。ハイブリッドプラスミドPLD723、PLD724、およびPLD728には、黄色ブドウ球菌のプラスミドPC194またはPE194の完全なDNA配列が含まれており、亜種にも複製することができます。しかし、亜ティリスBacillusにおけるKM遺伝子の発現は観察されませんでした。PLD728には、km遺伝子構造部分の始まりの前にあるUnical BGL IIサイトがあります。PLD728のこの特性は、このプラスミドで異なる種のプロモーター配列をクローニングする場合に役立つ場合があります。

On the base of plasmid pLD720 (a deletion derivative of the cosmid vector pHC79) a number of hybrid plasmids which confer in Escherichia coli cells the kanamycin resistance was constructed. All hybrid plasmids contain the promoterless part of kanamycin resistance gene (which codes for aminoglycoside 3'-phosphotransferase II) from transposon Tn5. The Km gene expression is driven by a promoters situated on pLD720. The hybrid plasmids pLD723, pLD724 and pLD728 contain a complete DNA sequences of plasmids pC194 or pE194 from Staphylococcus aureus that permits them to replicate into Bacillus subtilis as well. However, no expression of the Km gene in Bacillus subtilis was observed. There is a unical Bgl II site on pLD728 is front of the beginning of a Km gene structural part. This property of pLD728 may be useful when cloning in this plasmid a promoter sequences of different species.