膵臓および胆管がん循環腫瘍細胞（CTC）は、門脈循環に免疫耐性マルチセル型クラスターを形成します

循環腫瘍細胞（CTC）は、多くの癌腫から血液に入り、転移性播種の可能性のある供給源を表しています。末梢循環とは対照的に、KRAS変異陽性CTCは、膵管腺癌（PDAC）患者の門脈血液中で繁栄します。癌腫CTCの成長と免疫抵抗性に寄与する必須の相互作用を分析するために、門脈周囲病理学の41人の患者の膵臓二層切除中に門脈血液が収集されました（PDAC = 11;筋膜腺癌（AA）= 15;脊髄腺腫（CC）= 6; IPMN = 7;非悪性膵炎= 2）。門脈循環からのFACS分離細胞集団は、混合細胞反応培養（MCR）を使用してex vivoを再構成しました。最初の48時間中、PDAC、AA、およびCC患者CTCはすべて高度増殖性（平均1.7時間/細胞周期、61.5％±20％成長細胞）であり、アポトーシス（平均39％±25％アポトーシス細胞）に耐性がありました。PDAC CTCの増殖とT細胞細胞毒性に対する耐性は、術前化学療法を受けた患者の間で減少しました（それぞれP = 0.0019、P = 0.0191）。培養の7日後、PDAC、CC、およびAAのCTCは、球状のクラスターに組織化するために、CD105+CD14+骨髄性線維芽細胞を含む複数の免疫細胞タイプを補充しました。クラスター形成がCTCの生存、成長、および線維芽細胞の分化を促進したのは、PDACとCC由来のMCRのみでした。CTCまたは骨髄性線維芽細胞細胞のFACは、クラスターネットワークの形成を排除し、これらの細胞集団の再導入を排除し、そのような能力を再構成しました。我々の発見は、門脈静脈循環内のPDACおよびCC CTCの生存は、局所再発と転移の進行のベクターを表す可能性のあるマルチ細胞型クラスター内の免疫細胞との相互作用によって支持されていることを示唆しています。

Circulating tumor cells (CTC) enter the blood from many carcinomas and represent a likely source of metastatic dissemination. In contrast to the peripheral circulation, KRAS mutation- positive CTC thrive in the portal venous blood of patients with pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC). To analyze the essential interactions that contribute to carcinoma CTC growth and immune resistance, portal venous blood was collected during pancreatico-duodenectomy in 41 patients with peri-ampullary pathologies (PDAC = 11; ampullary adenocarcinoma (AA) = 15; distal cholangiocarcinoma (CC) = 6; IPMN = 7; non-malignant pancreatitis = 2). FACS-isolated cell populations from the portal circulation were reconstituted ex vivo using mixed cell reaction cultures (MCR). During the first 48hr, PDAC, AA, and CC patient CTC were all highly proliferative (mean 1.7 hr/cell cycle, 61.5% ± 20% growing cells) and resistant to apoptosis (mean 39% ±  25% apoptotic cells). PDAC CTC proliferation and resistance to T cell cytotoxicity were decreased among patients who received pre-operative chemotherapy (p = 0.0019, p = 0.0191, respectively). After 7 days in culture, CTC from PDAC, CC, and AA patients recruited multiple immune cell types, including CD105 + CD14 + myeloid fibroblasts, to organize into spheroid-like clusters. It was only in PDAC and CC-derived MCR that cluster formation promoted CTC survival, growth, and fibroblast differentiation. FACS depletion of CTC or myeloid fibroblast cells eliminated cluster network formation, and re-introduction of these cell populations reconstituted such ability. Our findings suggest that PDAC and CC CTC survival within the portal venous circulation is supported by their interactions with immune cells within multi-cell type clusters that could represent vectors of local recurrence and metastatic progression.