ゲル内トリクロロエタノール光反応をトリプトファンと使用したゲル電気泳動直後の蛍光タンパク質視覚化

SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動（SDS-PAGE）は、分子生物学および生化学研究所の重要な技術の1つであり、効率的なサンプル分析には迅速な視覚化方法が必要です。ポリアクリルアミドゲル上のタンパク質は、トリプトファンとトリクロロエタノールの光反応を介して5分以内に視覚化できます。このプロセスでは、タンパク質の固定、染色、または攻撃を必要としません。この方法では、ポリアクリルアミドゲルは、重合前にトリクロロエタノールを添加することにより調製されます。電気泳動後、ゲルは標準的なUVトランスアルミノーターですぐに活性化され、蛍光標識タンパク質が画像化されます。この反応は、タンパク質内のトリプトファン残基とトリクロロエタノールの光反応に基づいています。これにより、正確に画像化された可視青緑色蛍光（〜500 nm）が生成されます。ここでは、トリクロロエタノールを伴うトリスグリシンおよびトリストリシンSDS-ポリアクリルアミドゲルの調製と、タンパク質を含むトリプトファンの光反応と視覚化について説明します。

SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) is one of the essential techniques in molecular biology and biochemistry laboratories and requires rapid visualization methods for efficient sample analysis. Proteins on polyacrylamide gels can be visualized within 5 min via the photoreaction of tryptophan with trichloroethanol. This process does not require protein fixation, staining, or destaining. In this method polyacrylamide gels are prepared by adding trichloroethanol before polymerization. After electrophoresis, the gel is immediately activated on a standard UV transilluminator and the fluorescently labeled proteins are imaged. The reaction is based on the photoreaction of trichloroethanol with tryptophan residues within the protein. This generates a visible blue-green fluorescence (∼500 nm) that is accurately imaged. Here we describe the preparation of Tris-glycine and Tris-tricine SDS-polyacrylamide gels with trichloroethanol and the photoreaction and visualization of tryptophan containing proteins.