3 '---- 5'シルクウォーム核ポリヘドロシスウイルスのDNAポリメラーゼに関連するエキソヌクレアーゼの特性評価

3 '---- 5'シルクウォームポリヘドロシスウイルスのDNAポリメラーゼBombyx mori（BMNPV POL）のDNAポリメラーゼに適合した一本鎖DNAに特異的なエキソヌクレアーゼ。BMNPV POLには、一本鎖または二重DNAでの検出可能な5 '--- 3'エキソヌクレアーゼ活性がありません。3 '--- 5'エクソヌクレオリ溶解反応の産物の分析により、デオキシヌクレオシド一リン酸が一本鎖DNAの加水分解中に放出されたことが示されました。グリセロール勾配におけるBMNPV POLの超遠心分離中にポリメラーゼ活性を吸収したエキソヌクレアーゼ活性。BMNPV POLのポリメラーゼとエキソヌクレアーゼ活性は、ほぼ同一の速度論で熱によって不活性化されました。BMNPV Pol関連のエキソヌクレアーゼによる一本鎖DNAの加水分解のモードは、厳密に分布していました。酵素は、単一のDNMPの放出後に一本鎖DNAから解離し、次のポリヌクレオチドが分解されて再接続されました。

3'----5' Exonuclease specific for single-stranded DNA copurified with DNA polymerase of nuclear polyhedrosis virus of silkworm Bombyx mori (BmNPV Pol). BmNPV Pol has no detectable 5'----3' exonuclease activity on single-stranded or duplex DNA. Analysis of the products of 3'----5' exonucleolytic reaction showed that deoxynucleoside monophosphates were released during the hydrolysis of single-stranded DNA. The exonuclease activity cosedimented with the polymerase activity during ultracentrifugation of BmNPV Pol in glycerol gradient. The polymerase and the exonuclease activities of BmNPV Pol were inactivated by heat with nearly identical kinetics. The mode of the hydrolysis of single-stranded DNA by BmNPV Pol-associated exonuclease was strictly distributive. The enzyme dissociated from single-stranded DNA after the release of a single dNMP and then reassociated with a next polynucleotide being degradated.