PCR精製およびゲル抽出キットからのシリカカラムの迅速な再生と再利用

PCR精製およびゲル抽出キットのシリカカラムは、遺伝子クローン化を支援するために世界中の研究所で広く使用されています。ただし、これらの柱を使用すると、1回限りの設計と大規模な消費により、環境に影響を与えるプラスチック廃棄物を生成できます。したがって、シリカカラムの利用を減らすことができるが研究効率に影響を与えない新しい方法を開発することが重要です。この研究では、PCR精製およびゲル抽出キットから使用されたカラム内の残留DNAを排除するために、さまざまな化学的および非化学的試薬を使用しました。リン酸は、使用済みのカラムからDNA汚染を除去するためにテストされたものの中で最も効果的な試薬であることを示しています。1 Mリン酸を使用して再生されたカラムには、新鮮なカラムのそれに匹敵するDNA精製能力があります。シリカカラムを再生し、最低5回再利用できることを実証します。実験室で作られたバッファーは、DNA精製のための再生されたカラムと互換性があり、再生されたカラムで調製されたDNAは、遺伝子クローン効率に影響を与えることなく遺伝子クローニングに使用できます。したがって、この新しい方法を使用すると、実験室の廃棄物の生産が大幅に減少し、世界中の多くの研究所に利益をもたらします。

Silica columns from PCR purification and gel extraction kits are widely used in laboratories worldwide to assist in gene cloning. However, the use of these columns can generate plastic waste that has an environmental impact due to their one-off design and massive consumption. Thus, it is important to develop a novel method that can reduce the utilization of silica columns but not affect research efficiency. In this study, various chemical and nonchemical reagents were used to eliminate residual DNA within used columns from PCR purification and gel extraction kits. We show that phosphoric acid is the most effective reagent among those tested to remove DNA contamination from used columns. Columns regenerated using 1 M phosphoric acid have a DNA purification capability that is comparable to that of fresh columns. We demonstrate that silica columns can be regenerated and reused a minimum of five times. The lab-made buffers are compatible with the regenerated columns for DNA purification, and DNA that is prepared with the regenerated columns can be used for gene cloning without affecting the gene cloning efficiency. Thus, the use of this novel method greatly reduces the production of laboratory waste and benefits numerous laboratories worldwide.