バクテロイドrプラスミドPCP1のクリンダマイシン耐性、テトラサイクリン耐性、および複製機能をコードする領域の特性評価とマッピング

Bacteroides薬剤耐性プラスミドPCP1は、クレンダマイシン抵抗性（CLR）と、有酸素ではあるが嫌気的ではなく成長し、バクテロイデスSPPで表現型で発現していない大腸菌細胞で発現する謎めいたテトラサイクリン抵抗性（TCR）決定因子をコードします。PCP1上の遺伝機能の局在は、RK2移動起源を搭載したPBR322誘導体であるPDG5に結合されたPCP1の部分を含むハイブリッドシャトルプラスミドの構築によって促進されました。PDP1 Delta 4は、PDG5にリンクされたPCP1のBGLII欠失誘導体であり、大腸菌とBacteroides Fragilisの両方で維持できます。TN5変異誘発とサブクローニングを使用することにより、PCP1の1.2キロゼート直接反復の間にECORI BフラグメントにCLRおよびTCR領域を局在させました。CLRとTCRの決定要因は異なり、個別に転写されているように見えます。TCR表現型の制御は、その発現が構成的であり、隣接する直接反復を含む領域によって強化されるという点で珍しいことです。さらに、Bacteroides sppの複製に必要なPCP1の領域。隣接するecoriで断片が特定されています。

The Bacteroides drug resistance plasmid pCP1 encodes clindamycin resistance (Clr) and a cryptic tetracycline resistance (Tcr) determinant that is expressed in Escherichia coli cells grown aerobically, but not anaerobically, and is not expressed phenotypically in Bacteroides spp. Localization of genetic functions on pCP1 was facilitated by the construction of hybrid shuttle plasmids containing portions of pCP1 ligated to pDG5, a pBR322 derivative carrying the RK2 transfer origin. pDP1 delta 4 is a BglII deletion derivative of pCP1 linked to pDG5 and can be maintained in both E. coli and Bacteroides fragilis. By using Tn5 mutagenesis and subcloning, we localized the Clr and Tcr regions on the EcoRI B fragment between the 1.2-kilobase direct repeats of pCP1. The Clr and Tcr determinants are distinct and appear to be transcribed separately. Control of the Tcr phenotype is unusual in that expression is constitutive and is enhanced by a region encompassing the adjacent direct repeat. In addition, a region of pCP1 required for replication in Bacteroides spp. has been identified in the neighboring EcoRI A fragment.