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Analytical chemistry2018Sep18Vol.90issue(18)

トップダウン並列反応モニタリングMSを使用したヒト血漿中の無傷のタンパク質の定量

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, N.I.H., Extramural
概要
Abstract

質量分析による複雑な生物学的マトリックスにおけるタンパク質の直接的な定量化は依然として課題です。ここでは、シリコンマイクロ流体LC-MSチップを使用してマイクロフローLCナノスプレーMSによって有効になった、新しいトップダウン並列反応モニタリングマス分光法(PRM-MS)アッセイについて説明します。ヒト血漿中のソマトロピンなどの無傷のタンパク質の直接分析、感度(0.1-1.0 fmole)と速度(1〜5分)を酵素結合免疫吸着剤アッセイ(ELISA)と同等の速度(1〜5分)を達成しました。

質量分析による複雑な生物学的マトリックスにおけるタンパク質の直接的な定量化は依然として課題です。ここでは、シリコンマイクロ流体LC-MSチップを使用してマイクロフローLCナノスプレーMSによって有効になった、新しいトップダウン並列反応モニタリングマス分光法(PRM-MS)アッセイについて説明します。ヒト血漿中のソマトロピンなどの無傷のタンパク質の直接分析、感度(0.1-1.0 fmole)と速度(1〜5分)を酵素結合免疫吸着剤アッセイ(ELISA)と同等の速度(1〜5分)を達成しました。

Direct quantitation of proteins in complex biological matrices by mass spectrometry remains a challenge. Here, we describe a novel top-down parallel reaction monitoring-mass spectrometry (PRM-MS) assay, enabled by microflow LC-nanospray MS using a silicon microfluidic LC-MS chip. We demonstrated direct analysis of intact proteins such as somatropin in human plasma, achieving sensitivity (0.1-1.0 fmole) and speed (1-5 min) on par with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).

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