DNA合成の忠実度ピロリン酸誘発性誤った編成により、2つの校正メカニズムの検出が可能になります。

in vitro DNA合成の忠実度に対するピロリン酸の効果が調べられています。ピロリン酸は、PHI X174 DNAのコピーにおいて、大腸菌DNAポリメラーゼIによる誤解を促進します。誤解の増加は、重合速度の阻害の程度に直接比例します。対照的に、ピロリン酸は、鳥類骨髄芽細胞症ウイルスDNAポリメラーゼまたは動物細胞からのDNAポリメラーゼアルファおよびベータとの変異原性ではなく、校正に関連する活動がありません。これは、ピロリン酸による誤った組み込みの増加は、DNAポリメラーゼによる誤報の増加によるものではなく、むしろピロリン酸による校正の阻害によるものであることを示唆しています。ただし、ピオン酸誘発性の不倫は、3 '--- 5'エキソヌクレアーゼ校正の2つの実験マーカーとは異なる特異性を持ち、競合していません。すなわち、次のヌクレオチドの効果またはデオキシヌクレオシド一リン酸の添加。これらの特徴的な特徴は、ピロリン酸による阻害の影響を受けやすい2番目の校正モードを示唆しています。この概念は、文献に記載されている校正のモデルに関連して議論されています。

The effect of pyrophosphate on the fidelity of in vitro DNA synthesis has been examined. Pyrophosphate enhances misincorporation by Escherichia coli DNA polymerase I in copying phi X174 DNA. The increased misincorporation is directly proportional to the extent of inhibition of the rate of polymerization. In contrast, pyrophosphate is not detectably mutagenic with avian myeloblastosis virus DNA polymerase or DNA polymerases alpha and beta from animal cells, which lack associated proofreading activities. This suggests that increased misincorporation by pyrophosphate is not due to an increase in misinsertions by DNA polymerase, but rather due to inhibition of proofreading by pyrophosphate. However, the pyrophosphate-induced infidelity has a different specificity from, and is not competitive with, two experimental markers of 3'----5' exonuclease proofreading; i.e. the effects of the next nucleotide or the addition of deoxynucleoside monophosphates. These distinctive features suggest a second mode of proofreading susceptible to inhibition by pyrophosphate. This concept is discussed in relation to models for proofreading described in the literature.