E2F2の上方制御された発現は、p16ink4a誘発性軟骨損傷に必要です

背景：軟骨の劣化は変形性関節症（OA）をもたらします。いくつかの加齢性疾患に見られるP16ink4AWA。この研究では、OA中のP16ink4aの役割を決定し、基礎となるメカニズムを調査することを目指しました。 方法：酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）を実施して、老化関連分泌表現型（SASP）の活性をテストしました。リアルタイムPCR（RT-PCR）とウエスタンブロットを使用して、標的遺伝子の発現を決定しました。 結果：p16ink4aとE2F2の発現の増加には、IL-1βによって誘導される軟骨分解を伴いました。p16ink4aの過剰発現は、SASPマーカー（TGFβ、IL-6、IL-8、IL-1α、MMP3、およびMMP13）の分泌を強化し、II型プロコラゲン（COL2A1）の発現を減少させました。さらに、E2F2の発現はp16ink4a過剰発現群で増強され、p16ink4aによって引き起こされる軟骨損傷がE2F2を枯渇させることで緩和されることがわかりました。 結論：P16ink4aは、OAの軟骨損傷中にアップレギュレートされました。P16ink4aは、E2F2の発現を増加させることにより、軟骨損傷を促進しました。したがって、この研究は、OAの病理学的進行を理解するための分子調節ネットワークを拡張し、OAの潜在的な治療標的を提供します。

BACKGROUND: Cartilage degradation would result in osteoarthritis (OA). p16INK4awas found in some age-related diseases. In this study, we aimed to determine the role of p16INK4a during OA and to investigate the underlying mechanisms. METHODS: Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was performed to test the activity of senescence-associated secretory phenotype (SASP). Real-time PCR (RT-PCR) and Western blot were used to determine the expressions of target genes. RESULTS: The increased expressions of p16INK4a and E2F2 were accompanied with cartilage degradation induced by IL-1β. Over-expression of p16INK4a enhanced the secretion of SASP markers (TGFβ, IL-6, IL-8, IL-1α, MMP3 and MMP13), reduced the expression of type II procollagen (COL2A1).Thus, the over-expression of p16INK4a lead to cartilage injury. Moreover, we found that the expression of E2F2 was enhanced in p16INK4a over-expression group, and that cartilage injury caused by p16INK4a was alleviated by depleting E2F2. CONCLUSIONS: p16INK4a was up-regulated during the cartilage injury in OA. p16INK4a promoted cartilage injury by increasing the expression of E2F2. Thus, this study extends the molecular regulation network for understanding pathological progression of OA, and provides potential therapeutic target for OA.