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Organic & biomolecular chemistry2018Oct03Vol.16issue(38)

細胞における外因性および内因性遺伝子発現の光モード化のためのアンチセンスRNAの単一葉酸修飾でケージ化されたsiRNA

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

siRNA活性を手動で制御することは、遺伝子の発現と機能を平らに調査するための本質的に重要な方法です。操作の容易さと正確な操作により、siRNA誘発遺伝子サイレンシングの制御された調節に光を使用できます。ここでは、フォトラビルリンカーを介してsiRNAのアンチセンス鎖の5 '末端に葉酸修飾を伴う一連のケージに入れられたsiRNAを開発しました。葉酸部分の付着は、対応するsiRNA活性を一時的にマスクしました。照明時に、これらのケージに入れられたsiRNAが活性化され、それらの遺伝子サイレンシング活性が回復しました。この戦略に基づいて、細胞内の外因性遺伝子(緑色蛍光タンパク質、GFP)と内因性遺伝子(運動性キネシン-5、EG5の場合)の両方の遺伝子発現が成功しました。

siRNA活性を手動で制御することは、遺伝子の発現と機能を平らに調査するための本質的に重要な方法です。操作の容易さと正確な操作により、siRNA誘発遺伝子サイレンシングの制御された調節に光を使用できます。ここでは、フォトラビルリンカーを介してsiRNAのアンチセンス鎖の5 '末端に葉酸修飾を伴う一連のケージに入れられたsiRNAを開発しました。葉酸部分の付着は、対応するsiRNA活性を一時的にマスクしました。照明時に、これらのケージに入れられたsiRNAが活性化され、それらの遺伝子サイレンシング活性が回復しました。この戦略に基づいて、細胞内の外因性遺伝子(緑色蛍光タンパク質、GFP)と内因性遺伝子(運動性キネシン-5、EG5の場合)の両方の遺伝子発現が成功しました。

Manually controlling siRNA activity is an essentially important way to spatiotemporally investigate gene expression and function. Owing to ease of operation and precise manipulation, light can be used for controlled regulation of siRNA-induced gene silencing. Here, we developed a series of caged siRNAs with folic acid modification at the 5' terminus of the antisense strand of the siRNA through a photolabile linker. The attachment of the folic acid moiety temporarily masked the corresponding siRNA activity. Upon illumination, these caged siRNAs were activated, and their gene silencing activities were restored. Based on this strategy, we successfully photomodulated gene expression of both an exogenous gene (for green fluorescent protein, GFP) and an endogenous gene (for mototic kinesin-5, Eg5) in cells.

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