Schizosaccharomyces Pombeのプラスミドの複製：新しい遺伝的要素による対称分離の改善

分裂酵母Schizosaccharomyces Pombeで、広く使用されている酵母 - エシェリチア大腸菌シャトルベクターを特徴づけました。2ミクロンベクターPDB248およびYEP13は、S。pombeの高頻度、中間有糸分裂および低マイオティクスの安定性、および低コピー数を示しました。S. cerevisiaeの統合ベクトルPLEU2およびPURA3は、S。pombeを非常に低い周波数で変換しましたが、驚くべきことに、非統合的な方法で変換されました。代わりに、彼らは自律的に複製し、非常に高いコピー数を示しました（プラスミド含有細胞ごとに最大150コピー）。これは、S。pombeのプラスミドDNAの複製に対する配列特異性の欠如を反映している可能性があります。PFL20、S。pombeARSベクター、およびそれに由来する一連のプラスミドを研究して、このプラスミドの異常に高い安定性を分析しました。プラスミドの有糸分裂の安定性と分配は、形質転換されたS. pombe細胞の血統分析によって測定されました。S. Pombe DNAフラグメント（STB）が、有糸分裂と減数分裂におけるプラスミド分配の改善によりPFL20を安定化することを確認しました。

We characterized a number of widely used yeast-Escherichia coli shuttle vectors in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe. The 2 micron vectors pDB248 and YEp13 showed high frequency of transformation, intermediate mitotic and low meiotic stability, and a low copy number in S. pombe, analogous to their behavior in [cir0] strains of Saccharomyces cerevisiae. The S. cerevisiae integration vectors pLEU2 and pURA3 transformed S. pombe at very low frequencies but, surprisingly, in a nonintegrative fashion. Instead, they replicated autonomously, and they showed very high copy numbers (up to 150 copies per plasmid-containing cell). This could reflect a lack of sequence specificity for replication of plasmid DNA in S. pombe. pFL20, an S. pombe ars vector, and a series of plasmids derived from it were studied to analyze the unusually high stability of this plasmid. Mitotic stability and partitioning of the plasmids was measured by pedigree analysis of transformed S. pombe cells. An S. pombe DNA fragment (stb) was identified that stabilizes pFL20 by improvement of plasmid partitioning in mitosis and meiosis.