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ポジトロン放出断層撮影（PET）は、急速に拡大する非侵襲的分子イメージング技術であり、新しい特定のイメージングプローブに対する需要が高いです。ここでは、フッ化アルミニウムを抑制した複合剤（AL18F-RESCA）法を使用して、ポジトロン放出放射性同位体フッ素-18（18F）を使用した熱感受性生体分子の直接放射標識のための一般的なプロトコルを提示します。AL18F-RESCA法は、キレート剤ベースの放射標識法の化学的利点と、選択した放射性核種であるフッ素-18のユニークな物理的特性を組み合わせています。目的のタンパク質は、（±）-H3Resca-TFPを使用したアミンカップリングを介してレスカに共役し、その後、サイズ排除クロマトグラフィー（SEC）を使用した精製を使用できます。次に、フッ化アルミニウム（AL18F）を含む水性培地で、室温（〜20°C）で、1つのステップでレスカ誘導体の生体分子を標識できます。Al18F標識タンパク質は、18F-の開始活性に応じて、中程度（12-17 GBQ/µMol）で良好な（80-85 GBQ/µMol）見かけのモル活性を得ることができます。さらに、満足のいく放射能収量（35〜55％、非控除補正）および高い放射能純度（> 98％、ゲルろ過または固相精製）が得られます。軽度の放射性標識手順は完了するのに0.5時間かかり、ペプチド、タンパク質足場、操作された抗体断片などのベクター分子の直接標識に使用できます。
ポジトロン放出断層撮影（PET）は、急速に拡大する非侵襲的分子イメージング技術であり、新しい特定のイメージングプローブに対する需要が高いです。ここでは、フッ化アルミニウムを抑制した複合剤（AL18F-RESCA）法を使用して、ポジトロン放出放射性同位体フッ素-18（18F）を使用した熱感受性生体分子の直接放射標識のための一般的なプロトコルを提示します。AL18F-RESCA法は、キレート剤ベースの放射標識法の化学的利点と、選択した放射性核種であるフッ素-18のユニークな物理的特性を組み合わせています。目的のタンパク質は、（±）-H3Resca-TFPを使用したアミンカップリングを介してレスカに共役し、その後、サイズ排除クロマトグラフィー（SEC）を使用した精製を使用できます。次に、フッ化アルミニウム（AL18F）を含む水性培地で、室温（〜20°C）で、1つのステップでレスカ誘導体の生体分子を標識できます。Al18F標識タンパク質は、18F-の開始活性に応じて、中程度（12-17 GBQ/µMol）で良好な（80-85 GBQ/µMol）見かけのモル活性を得ることができます。さらに、満足のいく放射能収量（35〜55％、非控除補正）および高い放射能純度（> 98％、ゲルろ過または固相精製）が得られます。軽度の放射性標識手順は完了するのに0.5時間かかり、ペプチド、タンパク質足場、操作された抗体断片などのベクター分子の直接標識に使用できます。
Positron emission tomography (PET) is a quickly expanding, non-invasive molecular imaging technology, and there is high demand for new specific imaging probes. Herein, we present a generic protocol for direct radiolabeling of heat-sensitive biomolecules with the positron-emitting radioisotope fluorine-18 (18F) using the aluminum fluoride restrained complexing agent (Al18F-RESCA) method. The Al18F-RESCA method combines the chemical advantages of a chelator-based radiolabeling method with the unique physical properties of the radionuclide of choice, fluorine-18. Proteins of interest can be conjugated to RESCA via amine coupling using (±)-H3RESCA-TFP, followed by purification using size-exclusion chromatography (SEC). Next, RESCA-derivatized biomolecules can be labeled in one step, at room temperature (~20 °C) in an aqueous medium with aluminum fluoride (Al18F). Al18F-labeled proteins can be obtained with moderate (12-17 GBq/µmol) to good (80-85 GBq/µmol) apparent molar activity, depending on the starting activity of 18F-. In addition, satisfactory radiochemical yields (35-55%, non-decay corrected) and high radiochemical purity (>98%, using gel filtration or solid-phase purification) are obtained. The mild radiolabeling procedure takes 0.5 h to complete and can be used for direct labeling of vector molecules such as peptides, protein scaffolds, and engineered antibody fragments.
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