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ナノファイバーの足場は、1型糖尿病療法の新しい戦略と見なされます。ヒト誘導多能性幹細胞（HIPSCS）への分化のための3次元（3D）培養モデルとして、ポリL-乳酸（PLLA）とポリカプロラクトン（PCL）のハイブリッドを使用しました。（2d）。細胞の形態学的変化は、顕微鏡でチェックされました。7日目のmRNA内胚葉SOX-17および膵臓遺伝子マーカーPDX1、グルカゴン、およびGLUT2は、23日目にQPCRによって評価されました。同様に、インスリンおよびC-ペプチドタンパク質の発現は、免疫細胞化学染色によって評価されました。さらに、さまざまなグルコース濃度におけるインスリンおよびCペプチド分泌をELISAによって評価しました。光および走査型電子顕微鏡（SEM）顕微鏡は、誘導細胞の変化を示しました。タンデムでは、これらの修正は3日間の培養でより明白でした。PLLA/PCLのPDX1、グルカゴン、GLUT2マーカーは、3日間の培養で有意に高かった。さらに、定性的免疫化学は、インスリンとC-ペプチドが2 dおよび3日培地で発現していることを示しました。さらに、インスリンとC-ペプチドの評価により、PLLA/PCL足場におけるこれらのタンパク質の分泌は、2 Dおよび3 D戦略で統計的に異なることを明らかにしました。これらの発見は、PLLA/PCL足場の機能的成熟誘導細胞が膵島ベータ細胞療法と再生医療に使用できることを示唆しています。
ナノファイバーの足場は、1型糖尿病療法の新しい戦略と見なされます。ヒト誘導多能性幹細胞（HIPSCS）への分化のための3次元（3D）培養モデルとして、ポリL-乳酸（PLLA）とポリカプロラクトン（PCL）のハイブリッドを使用しました。（2d）。細胞の形態学的変化は、顕微鏡でチェックされました。7日目のmRNA内胚葉SOX-17および膵臓遺伝子マーカーPDX1、グルカゴン、およびGLUT2は、23日目にQPCRによって評価されました。同様に、インスリンおよびC-ペプチドタンパク質の発現は、免疫細胞化学染色によって評価されました。さらに、さまざまなグルコース濃度におけるインスリンおよびCペプチド分泌をELISAによって評価しました。光および走査型電子顕微鏡（SEM）顕微鏡は、誘導細胞の変化を示しました。タンデムでは、これらの修正は3日間の培養でより明白でした。PLLA/PCLのPDX1、グルカゴン、GLUT2マーカーは、3日間の培養で有意に高かった。さらに、定性的免疫化学は、インスリンとC-ペプチドが2 dおよび3日培地で発現していることを示しました。さらに、インスリンとC-ペプチドの評価により、PLLA/PCL足場におけるこれらのタンパク質の分泌は、2 Dおよび3 D戦略で統計的に異なることを明らかにしました。これらの発見は、PLLA/PCL足場の機能的成熟誘導細胞が膵島ベータ細胞療法と再生医療に使用できることを示唆しています。
Nanofibrous scaffolds are considered as a new strategy for Type 1 diabetes mellitus therapy. We used a hybrid of poly-l-lactic acid (PLLA) and polycaprolactone (PCL) as three-dimensional (3D) culture models for differentiation of human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) to beta islet-like cluster cell compared with routine culture (2D). Morphological changes of cells were checked by microscope. mRNA endodermal SOX-17 on day 7 and pancreatic gene markers Pdx1, glucagon and Glut2 were evaluated on day 23 by qPCR. As well as, insulin and C-peptide protein expression was evaluated by immunocytochemistry staining. In addition, insulin and C-peptide secretion in various glucose concentrations was evaluated by ELISA. Light and scanning electron microscopy (SEM) microscope showed changes in induced cells. In tandem, these modifications were more evident in 3 D culture. Pdx1, Glucagon and Glut2 markers in PLLA/PCL were significantly higher in 3 D culture. In addition, qualitative immunochemistry showed that insulin and C-peptide were expressed in 2 D and 3 D culture medium. Furthermore, evaluation of insulin and C-peptide clarified that secretion of these proteins in PLLA/PCL scaffold were statistically different in 2 D and 3 D strategies. These findings suggest that functional matured induction cells on PLLA/PCL scaffold can be used for islet beta cell therapy and regenerative medicine.
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