（Na++ k+） - ATPase：酵素-ATP解離速度定数のNa+ -ATPase活性推定のホスホインテルメディー剤の3プールモデルの確認

（Na++ K+） - 牛の脳、牛の腎臓、豚の腎臓のATPaseの酸安定性ホスホインテルメディエイトの脱リン酸化動態は、0度Cで研究されました。Na+、1 mM mg2+および25 microM [gamma-32p] ATPは、Na+濃度によって決定されるEPプール組成の逆に、すべてのホスホ酵素がADP-またはK+感受性であることを示しています。1 mM mg2+、25ミクロム[ガンマ-32p] ATPおよび150-1000 mM Na+の0度Cでの腎臓酵素のリン酸化後、ADPおよびK+感受性ホスホ酵素の量は、1 mm ATP+ 2.5 mM ADPの添加により決定されました。または1 mm ATP + 20 mm K +。脳酵素に関する以前に報告された結果と同様に、両方のタイプの脱リン酸化曲線は高速かつゆっくりした相を持っているため、腎臓酵素では、添加後、1000 mm Na+で最大80％のホスホ酵素の一部のゆっくりとした減衰があります。1 mmのATP + 20 mM K +が観察されます。したがって、腎臓酵素で得られた結果は、（Na++ K+） - ATPase活性の中間体としてE1 P（Na3）が果たす役割についての以前の疑念を強化するようです。さらに、両方の腎臓酵素では、ADPとK+感受性のホスホ酵素の合計はE TOTよりも大きい。脳酵素の実験では、酵素-ATP複合体K-1の解離速度定数の推定値が得られます。K-1は1〜4 S-1の間で変化し、複合体の形成中に存在するリガンドに依存しているようです。最高値は、Na+またはTris+の存在下で形成された酵素-ATP複合体で見られます。結果は、Na+-ATPase活性のホスホインテルメディー酸塩の脱リン酸化動態を記述する際の3プールモデルの妥当性を確認します。

The dephosphorylation kinetics of acid-stable phosphointermediates of (Na+ + K+)-ATPase from ox brain, ox kidney and pig kidney was studied at 0 degree C. Experiments performed on brain enzyme phosphorylated at 0 degree C in the presence of 20-600 mM Na+, 1 mM Mg2+ and 25 microM [gamma-32P]ATP show that irrespectively of the EP-pool composition, which is determined by Na+ concentration, all phosphoenzyme is either ADP- or K+-sensitive. After phosphorylation of kidney enzymes at 0 degree C with 1 mM Mg2+, 25 microM [gamma-32P]ATP and 150-1000 mM Na+ the amounts of ADP- and K+-sensitive phosphoenzymes were determined by addition of 1 mM ATP + 2.5 mM ADP or 1 mM ATP + 20 mM K+. Similarly to the previously reported results on brain enzyme, both types of dephosphorylation curves have a fast and a slow phase, so that also for kidney enzymes a slow decay of a part of the phosphoenzyme, up to 80% at 1000 mM Na+, after addition of 1 mM ATP + 20 mM K+ is observed. The results obtained with the kidney enzymes seem therefore to reinforce previous doubts about the role played by E1 approximately P(Na3) as intermediate of (Na+ + K+)-ATPase activity. Furthermore, for both kidney enzymes the sum of ADP- and K+-sensitive phosphoenzymes is greater than E tot. In experiments on brain enzyme an estimate of dissociation rate constant for the enzyme-ATP complex, k-1, is obtained. k-1 varies between 1 and 4 s-1 and seems to depend on the ligands present during formation of the complex. The highest values are found for enzyme-ATP complex formed in the presence of Na+ or Tris+. The results confirm the validity of the three-pool model in describing dephosphorylation kinetics of phosphointermediates of Na+-ATPase activity.