アリロキシカルボニル-O-メチルアミノアニリドを使用したペプチドのリゲーション：パルミトイル化ソニックヘッジホッグの化学合成

溶液中のペプチドのC末端活性化の簡単な手順と、天然の化学的ライゲーションとタンパク質合成におけるその応用について説明します。この方法には、水性条件下でのアリロキシ-o-メチルアミノアニリドからチオエステルへの変換と、N末端システインペプチドによるその場での軽度のチオエステル化が含まれます。汎用性は、pH制御された連続的なリゲーションに示されています。この方法論の有用性を説明するために、ヒトソニックヘッジホッグのパルミトイル化されたN末端ドメインを合成しました。これは、胚の発達と多腫瘍の増殖に関与する膜貫通受容体に結合し、ヘッジホッグシグナル伝達経路を活性化するモルフォゲンタンパク質です。このアプローチは、O-アミノアニリドとO-メチルアミノアニリドペプチドに基づいた化学タンパク質合成の化学ツールセットを拡張します。

A simple procedure for C-terminal activation of peptides in solution and its application in native chemical ligation and protein synthesis is described. This method involves a mild thioesterification based on the conversion of an aryloxy-o-methylaminoanilide to thioester under aqueous conditions and in situ ligation with an N-terminal cysteine peptide. The versatility is shown in pH-controlled sequential ligations. To illustrate the usefulness of this methodology, we synthesized the palmitoylated N-terminal domain of human Sonic Hedgehog, a morphogen protein that binds the transmembrane receptor Patched and activates the Hedgehog signaling pathway, involved in embryonic development and in the proliferation of multiple tumors. This approach extends the chemical toolset of chemical protein synthesis based on o-aminoanilide and o-methylaminoanilide peptides.