グルコース-1-ホスホトランスフェラーゼとN-アセチルグルコサミン-1-ホスホトランスフェラーゼは、異なる受容体特異性を持っています

UDP-グルコース：糖タンパク質グルコース-1-ホスホトランスフェラーゼ（GLC-ホスホトランスフェラーゼ）は、受容体グリコプロタン上のアルファGLC-1-PのUDP-GLCからエンドグリコシダーゼH感受性オリゴ糖への移動を触媒します。Glc-ホスホトランスフェラーゼはヌクレオチド糖基質としてUDP-GLCに特異的であり、したがってUDP-N-アセチルグルコサミン：糖タンパク質N-アセチルグルコサミン-1-ホスホトランスフェラーゼ（GlcNAc-Hosphotransferaseに特化しているために、緑豊かなホスホトランゼに異なるように見えることが以前に実証されています。糖タンパク質。ここでは、[beta-32p] UDP-GLCの存在によって標識された胚性ひよこ神経網膜ホモジネートにおける内因性受容体糖タンパク質のドデシル硫酸ナトリウム - ポリアクリルアミドゲル電気泳動のオートラジオグラフィーは、[Beta-32p] UDP-GLCNACの識別によって標識されたものとは異なるものとは異なることが示されました。内因性糖タンパク質。これらの酵素のアクセプター特異性をさらに調査するために、GLCNAC-ホスホトランスフェラーゼの外因性受容体であることが知られている3つの糖タンパク質が、網膜ホモジネートのGLC-ホスホトランスフェラーゼのアッセイに含まれていました。カテプシンDおよびベータ-N-アセチルヘキソサミニダーゼは、ホスホグルコースの取り込みに有意な影響を及ぼさなかった。酸性ホスファターゼである子宮フェリンは、UDP-GLCからの取り込みに対する阻害効果が顕著であり、その後の実験は、GLC-ホスホトランスフェラーゼまたは他のタンパク質のリン酸化が最大活性を見るために見られることを示唆しました。また、以前にGLCNAC-ホスホトランスフェラーゼ活性を持たないことが以前に示されていたI細胞は、GLC-ホスホトランスフェラーゼとGLCNAC-ホスホトランスフェラーゼの両方についてアッセイされました。GLCNAC-ホスホトランスフェラーゼ活性はコントロール細胞でのみ観察されましたが、同様の特定の活性ではI細胞とコントロールの両方でGLC-ホスホトランスフェラーゼが観察されました。

UDP-glucose:glycoprotein glucose-1-phosphotransferase (Glc-phosphotransferase) catalyzes the transfer of alpha Glc-1-P from UDP-Glc to endoglycosidase H-sensitive oligosaccharides on acceptor glycoproteins. We have previously demonstrated that Glc-phosphotransferase was specific for UDP-Glc as its nucleotide sugar substrate and thus appeared to be distinct from UDP-N-acetylglucosamine:glycoprotein N-acetylglucosamine-1-phosphotransferase (GlcNAc-phosphotransferase), an enzyme specific for lysosomally destined acceptor glycoproteins. Here, sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis autoradiographs of endogenous acceptor glycoproteins in embryonic chick neural retina homogenates labeled by the presence of [beta-32P]UDP-Glc were shown to be distinct from those labeled by [beta-32P]UDP-GlcNAc, indicating that the two enzymatic activities recognize different populations of endogenous glycoproteins. To further probe the acceptor specificities of these enzymes, three glycoproteins known to be exogenous acceptors for GlcNAc-phosphotransferase were included in assays for Glc-phosphotransferase from retinal homogenates. Cathepsin D and beta-N-acetylhexosaminidase had no significant effects on phosphoglucose incorporation. Uteroferrin, an acid phosphatase, had a pronounced inhibitory effect on incorporation from UDP-Glc, and subsequent experiments suggested that phosphorylation of the Glc-phosphotransferase or another protein may be necessary for maximal activity to be seen. Also, I-cells, which have previously been shown to possess no GlcNAc-phosphotransferase activity, and control human fibroblasts were assayed for both Glc-phosphotransferase and GlcNAc-phosphotransferase. GlcNAc-phosphotransferase activity was observed only in control cells, whereas Glc-phosphotransferase was observed in both I-cells and controls at similar specific activities.