血小板中のイノシトール1,4,5-トリホスホート誘導顆粒分泌は、血小板トロムボキサン受容体によって媒介されるホスホリパーゼCの活性化が、トロンビンのそれとは異なるグアニンヌクレオチド依存性タンパク質依存性メカニズムを伴うことを証明しています。

トロンビンによって刺激された血小板におけるホスホイノシチドの加水分解は、Gpと呼ばれる百日咳毒素感受性グアニンヌクレオチド結合タンパク質（Gタンパク質）によって調節されていると考えられています。本研究では、トロンボキサン A2 類似体 U46619 に対する血小板応答と、ホスホイノシチド加水分解生成物イノシトール 1,4,5-三リン酸 (IP3) の分泌を引き起こす経路における Gp の役割を調べます。透過性血小板では、U46619 がホスファチジン酸の形成と分泌を引き起こしましたが、これらは G タンパク質阻害剤であるグアノシン 5'-O-(2-チオホスフェート) (GDP ベータ S) によって無効にされました。しかし、トロンビンとは異なり、U46619 誘発ホスホイノシチド加水分解は百日咳毒素の影響を受けず、U46619 は血小板中の 42 kD 百日咳毒素基質の [32 P]ADP リボシル化を阻害できませんでした。細胞内Ca放出とその後のアラキドン酸代謝に依存することが知られているIP3誘導性分泌も、Ca誘導性分泌と同様にGDPβSによって阻害された。これらの観察は、血小板トロンボキサン A2 (TxA2) 受容体が、トロンビン受容体に結合しているものとは異なる毒素耐性型の Gp に結合していること、および TxA2 刺激によるホスホイノシチド加水分解が、アラキドン酸の刺激を引き起こすフィードバック機構として機能している可能性があることを示唆しています。IP3 や Ca などの酸の放出は、アゴニストに対する反応を増幅します。

Phosphoinositide hydrolysis in platelets stimulated by thrombin is thought to be regulated by a pertussis toxin-sensitive guanine nucleotide binding protein (G protein) referred to as Gp. The present studies examine the role of Gp in platelet responses to the thromboxane A2 analogue U46619 and in the pathway by which the phosphoinositide hydrolysis product inositol 1,4,5-triphosphate (IP3) causes secretion. In permeabilized platelets, U46619 caused phosphatidic acid formation and secretion, which were abolished by the G protein inhibitor, guanosine 5'-O-(2-thiophosphate) (GDP beta S). Unlike thrombin, however, U46619-induced phosphoinositide hydrolysis was unaffected by pertussis toxin, and U46619 was unable to inhibit the [32P]ADP ribosylation of the 42-kD pertussis toxin substrate in platelets. IP3-induced secretion, which is known to depend upon intracellular Ca release and subsequent arachidonic acid metabolism, was also inhibited by GDP beta S, as was Ca-induced secretion. These observations suggest that platelet thromboxane A2 (TxA2) receptors are coupled to a toxin-resistant form of Gp distinct from the one that is coupled to thrombin receptors, and that TxA2-stimulated phosphoinositide hydrolysis may serve as a feedback mechanism by which stimuli for arachidonic acid release, such as IP3 and Ca, amplify responses to agonists.