脂肪組織由来の幹細胞の分離：機械的歪みと組み合わせて酵素消化をして、ヒト吸引脂肪からの脂肪組織由来の幹細胞収量を増加させる

間葉系幹細胞（MSC）は、免疫調節、組織の再生、多能性分化の特性により、非常に興味深いものです。ただし、臨床応用の将来の発展には、MSCの収量が高く、培養中の細胞の通路の数が少なく、収穫から使用まで短い時間が必要です。間葉系脂肪組織由来の幹細胞分離の技術の最適化と標準化は、より多くのMSCを分離できるため、現在のボトルネックのソリューションを提供します。これらの改善により、拡張時間が短くなり、必要なドナー材料が少なくなり、MSC収量が増加します。このホワイトペーパーでは、酵素消化とメカニックの混乱を組み合わせたMSC分離法について説明します。このプロトコルは、従来の酵素的分離プロトコルと比較して、MSC収量が大幅に高くなるための標準化された簡単な実装方法です。提示された結果に基づいて、酵素と機械的な方法を組み合わせて脂肪組織の表面積を増加させ、酵素による消化を促進すると仮定します。このアプローチは、脂肪組織の量を減らし、臨床目的で十分な量のMSCに到達するために必要なin vitroの拡大時間を短縮します。重要なことに、この方法では、コラゲナーゼの量を増やす必要はなく、MSCの生存率や分化性を損なうこともありません。このプロトコルを使用すると、MSC収量が3倍になります。結果として、これらの結果は、脂肪組織におけるMSCの生理学的濃度が以前に想定されていたよりも高いことを示しています。©2018 by John Wiley＆Sons、Inc。

Mesenchymal stem cells (MSCs) are of great interest due to their properties of immune modulation, tissue regeneration, and multipotent differentiation. Future developments of clinical applications, however, require a higher yield of MSCs, lower number of passages of cells in culture, and shorter time from harvest to use. Optimization and standardization of techniques for mesenchymal adipose tissue-derived stem cell isolation offers solutions to current bottlenecks as a larger amount of MSCs can be isolated. These improvements result in shorter expansion time, fewer passages, less donor material needed, and higher MSC yield. This paper describes an MSC isolation method combining enzymatic digestion with mechanic disruption. This protocol is a standardized and easy-to-implement method for reaching significantly higher MSC yields compared to conventional enzymatic isolation protocols. Based on the results presented, we hypothesize that the combined enzymatic and mechanical method increases the surface area of the adipose tissue, facilitating digestion by enzymes. This approach reduces the amount of adipose tissue and in vitro expansion time needed to reach sufficient amounts of MSCs for clinical purposes. Importantly, the method does not require increased amounts of collagenase, nor does it impair the viability or differentiability of the MSCs. Using this protocol increases MSC yield by a factor of three. As a consequence, these results indicate that the physiological concentration of MSCs in adipose tissue is higher than previously assumed. © 2018 by John Wiley & Sons, Inc.