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Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)20190101Vol.1889issue()

蛍光活性化細胞ソーティング(FACS)を使用したヒト筋肉からの筋原性前駆細胞の精製

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, N.I.H., Extramural
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

ヒト組織に由来する一次筋芽細胞は、筋肉疾患と病態生理の研究における貴重なツールです。しかし、特に病気の筋肉からの骨格筋生検では、筋原性細胞集団の精製が必要であることが必要です。このプロトコルは、蛍光活性化細胞ソート(FACS)によるヒトの骨格筋生検からの細胞の解離の技術と、高筋原性集団の濃縮の技術について説明します。また、その後のin vitro研究のための筋原性と集団拡大を評価する方法についても説明します。

ヒト組織に由来する一次筋芽細胞は、筋肉疾患と病態生理の研究における貴重なツールです。しかし、特に病気の筋肉からの骨格筋生検では、筋原性細胞集団の精製が必要であることが必要です。このプロトコルは、蛍光活性化細胞ソート(FACS)によるヒトの骨格筋生検からの細胞の解離の技術と、高筋原性集団の濃縮の技術について説明します。また、その後のin vitro研究のための筋原性と集団拡大を評価する方法についても説明します。

Primary myoblasts derived from human tissue are a valuable tool in research of muscle disease and pathophysiology. However, skeletal muscle biopsies, especially from diseased muscle, contain a plethora of non-myogenic cells, necessitating purification of the myogenic cell population. This protocol describes techniques for dissociation of cells from human skeletal muscle biopsies and enrichment for a highly myogenic population by fluorescence-activated cell sorting (FACS). We also describe methods for assessing myogenicity and population expansion for subsequent in vitro study.

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