miR-203は、EGR1およびFGF2を標的とすることにより、ケロイド線維芽細胞の増殖、浸潤、および細胞外マトリックス発現を調節します

ケロイドは、真皮における線維芽細胞増殖の増加と細胞外マトリックス（ECM）の過剰産生によって引き起こされる皮膚の繊維性良性腫瘍です。いくつかのmiRNAは、ケロイドの発達を調節する上で重要な役割を示しています。これは、ケロイド線維芽細胞におけるmiR-203の効果とメカニズムを調査することを目的とした研究です。miR-203発現はQRT-PCRによって検出されました。細胞生存率はMTTアッセイによって測定されました。細胞の増殖は、BRDUアッセイによって測定されました。細胞浸潤は、Transwellアッセイによって測定されました。タンパク質の発現はウエスタンブロットによって検出されました。miR-203とmRNAの標的関係は、二重ルシフェラーゼアッセイによって測定されました。miR-203は、ケロイド患者のケロイド組織とケロイド線維芽細胞の両方で有意にダウンレギュレートされていることがわかりました。in vitroでのmiR-203の過剰発現は、ケロイド線維芽細胞における増殖、浸潤、およびECM産生の有意な減少をもたらしましたが、miR-203阻害は反対の結果を誘発しました。デュアルルシフェラーゼレポーターアッセイは、MIR-203の標的として初期成長応答1（EGR1）および線維芽細胞成長因子2（FGF2）を同定しました。EGR1およびFGF2はケロイド線維芽細胞で過剰発現し、miR-203によって負に調節されました。さらに、EGR1およびFGF2の過剰発現は、ケロイド線維芽細胞の増殖、浸潤、およびECM産生に対するmiR-203の抑制効果を部分的に減衰させました。結論として、MiR-203がEGR1およびFGF2発現を抑制することによりケロイド線維芽細胞の増殖、浸潤、およびECM産生を減少させ、ケロイドを予防および治療する際のmiR-203の潜在的な役割を示唆したことを初めて実証しました。

Keloid is a fibrous benign tumor of the skin caused by increased fibroblast proliferation and overproduction of extracellular matrix (ECM) in the dermis. Several miRNAs exhibit critical roles in regulating keloid development. This is study aimed to investigate the effects and mechanisms of miR-203 in keloid fibroblasts. The miR-203 expression was detected by qRT-PCR; The cell viability was measured by MTT assay; The cell proliferation was measured by BrdU assay; The cell invasion was measured by Transwell assay; The protein expression was detected by Western blot; The target relationship between miR-203 and mRNA was measured by dual-luciferase assay. We found that miR-203 was significantly downregulated in both keloid tissues and keloid fibroblasts from keloid patients. MiR-203 overexpression in vitro led to a significant decrease of proliferation, invasion, and ECM production in keloid fibroblasts, whereas miR-203 inhibition induced the opposite results. A dual-luciferase reporter assay identified early growth response 1 (EGR1) and fibroblast growth factor 2 (FGF2) as targets of miR-203. EGR1 and FGF2 were overexpressed in keloid fibroblasts and negatively regulated by miR-203. Furthermore, overexpression of EGR1 and FGF2 partially attenuated the suppressive effect of miR-203 on the proliferation, invasion, and ECM production of keloid fibroblasts. In conclusion, we demonstrated for the first time that miR-203 decreased the proliferation, invasion, and ECM production of keloid fibroblasts by repressing EGR1 and FGF2 expression, suggesting a potential role of miR-203 in preventing and treating keloids.