SARM YK11のin vivo代謝に関する研究：ドーピングコントロールに潜在的に有用な代謝産物の識別と特性評価

ステロイド化合物は、押収された闇市場製品で最近検出され、（17α、20e）-17,20 - [（1-メトキシエチリデン）ビス（酸素）Bis（酸素）] -3-oxo-19-Norpregna-4,20-ジエン-21-カルボン酸メチルエステル（YK11）として同定されました。この化合物は、選択的なアンドロゲン受容体変調器およびミオスタチン阻害剤様特性を有することが記載されています。YK11は実験的な薬物候補であり、人間の承認のない物質であるため、その代謝に関する科学的データは希少です。そのステロイド骨格と、間違いなくD-ringに配置された間違いなく不安定なオルソース由来部分により、in vivoでの実質的な代謝変換が予想されました。YK11の尿中代謝物を明確に検出するために、6倍の重水素化YK11を含む除去研究が実施されました。投与後の標本は、基本的な質量分析データとともに代謝物を識別するために、単一四重極質量分析と結合した水素同位体比質量分析を使用して分析されました。スポーツ薬物検査に関連するこれらの代謝産物のさらなる特性評価は、ガスクロマトグラフィー高解像度の高精度質量分析を使用して達成されました。14の重湿性尿中代謝産物は、非結合、グルクロン酸酸化、硫酸化代謝物を含む検出されました。予想どおり、排出研究尿サンプルでは無傷のYK11は観察されませんでした。非統合された代謝産物は、投与後24時間以内に消失しましたが、グルクロン酸塩と硫酸化された代謝物の両方が48時間以上追跡可能でした。最も有望な2つのグルクロン酸代謝産物（5β-19-nor-ペレグナン-3α、17β、20-トリオール、および5β-19-NOR-ペレグナン-3α、17β-ジオール-20-one）の化学構造は、核磁気共鳴分析によってコンデュースされた社内合成によって検証されました。スポーツ薬物検査の可能性を解明するために、両方とも同化薬剤の検出のために現在適用されている分析方法に正常に実装されました。

A steroidal compound was recently detected in a seized black market product and was identified as (17α,20E)-17,20-[(1-methoxyethylidene) bis (oxy)]-3-oxo-19-norpregna-4,20-diene-21-carboxylic acid methyl ester (YK11). This compound is described to possess selective androgen receptor modulator- and myostatin inhibitor-like properties. As YK11 is an experimental drug candidate and a non-approved substance for humans, scientific data on its metabolism is scarce. Due to its steroidal backbone and the arguably labile orthoester-derived moiety positioned at the D-ring, substantial metabolic conversion in vivo was anticipated. To unambiguously detect urinary metabolites of YK11, an elimination study with six-fold deuterated YK11 was conducted. Post-administration specimens were analyzed using hydrogen isotope ratio mass spectrometry coupled to single quadrupole mass spectrometry to identify metabolites alongside basic mass spectrometric data. Further characterization of those metabolites relevant to sports drug testing was accomplished using gas chromatography-high resolution-high accuracy mass spectrometry. Fourteen deuterated urinary metabolites were detected comprising unconjugated, glucuronidated, and sulfoconjugated metabolites. As expected, no intact YK11 was observed in the elimination study urine samples. While the unconjugated metabolites disappeared within 24 hours post-administration, both glucuronidated and sulfated metabolites were traceable for more than 48 hours. The chemical structures of the two most promising glucuronidated metabolites (5β-19-nor-pregnane-3α,17β,20-triol and 5β-19-nor-pregnane-3α,17β-diol-20-one) were verified by in-house synthesis of both metabolites and confirmed by nuclear magnetic resonance analysis. In order to elucidate their potential in sports drug testing, both were successfully implemented into the currently applied analytical method for the detection of anabolic agents.