ヘキサフルオロオプロパノール - アルキルカルキシル酸高密度超分子溶媒ベースのヒト尿中のステロイド性ホルモンの分散液液微量抽出

ヘキサフルロイロイソプロパノール（HFIP） - アルキルカルボン酸高密度超分子溶媒（Supras）が提案され、高速液体クロマトグラフィーによる分析の前に、ヒト尿中のヒト尿中のステロイド性ホルモンの抽出および前処理のための分散液液マイクロ抽出（DLLME）と組み合わされました。タンデム質量分析（HPLC-MS/MS）。オクタン酸を抽出剤およびHFIPとして使用し、高密度、強力な水素結合ドナー、高疎水性の特性を備えて、DLLMEの分散剤として、およびcoaCervation誘発剤および密度調節剤の密度調節剤として使用しました。HFIP-オクタン酸のスプラスは、DLLMEのプロセスで自然に形成され、水よりも高い密度のために尿溶液の底に位置していました。したがって、微量体積でのスーパーフェーズは、通常の遠心チューブを使用して遠心分離後に収集するのが簡単でした。5つのホルモン（4つのエストロゲンとプロゲステロン）が分析対象として選択されました。尿加水分解時間、抽出条件、エストロゲンの誘導体化条件が最適化されました。最適な条件下では、0.07 mLの有機溶媒（HFIP）のみが消費されました。外部標準キャリブレーション法が定量化に使用され、0.9957を超える相関係数と0.0001未満の線形トレンドのp値で線形関係が得られました。3の信号対雑音比に基づくメソッドの検出の制限は0.01-0.10μgL-1でした。回収率は82.7％から120.2％の範囲であり、メソッドの日中および日中の相対標準偏差は15％未満でした。84.0％-105.7％のマトリックス効果は、MS検出との尿マトリックスの干渉を示しませんでした。これは、主に逆ミセル凝集体を備えたHFIP-オクタン酸スプラスのアクセス特性が制限されているためです。マトリックス効果の欠如は、外部キャリブレーションによる信頼できる定量に寄与し、高価な同位体標識内部標準の使用を回避しました。HPLC-MS/MSと組み合わせた新しいスーパーベースのDLLMEメソッドは、実際の尿中の標的ホルモンの測定に適用されました。

A hexafluroisopropanol (HFIP)-alkyl carboxylic acid high-density supramolecular solvent (SUPRAS) was proposed and combined with dispersive liquid-liquid microextraction (DLLME) for extraction and preconcentration of steroid sex hormones in human urine prior to analysis by high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS). Octanoic acid was used as extraction agent and HFIP, with the properties of high density, strong hydrogen bond donor and high hydrophobicity, was used as dispersing agent of DLLME as well as coacervation-inducing agent and density-regulating agent of octanoic acid. HFIP-octanoic acid SUPRAS was spontaneously formed in the process of DLLME and located in the bottom of a urine solution due to its density higher than water. Thus, the SUPRAS phase at trace volume was easy to be collected after centrifugation using normal centrifuge tubes. Five hormones (four estrogens and progesterone) were chosen as analytes. Urine hydrolysis time, extraction conditions and derivatization conditions for estrogens were optimized. Under the optimal conditions, only 0.07 mL of organic solvent (HFIP) was consumed. An external standard calibration method was used for quantification, and a linear relationship was obtained with correlation coefficients higher than 0.9957 and p values for linear trend less than 0.0001. Limits of detection of the method based on a signal-to-noise ratio of 3 were 0.01-0.10 μg L-1. The recoveries ranged from 82.7% to 120.2%, and intra-day and inter-day relative standard deviations of the method were less than 15%. The matrix effects of 84.0%-105.7% showed no urine matrix interferences with MS detection, which was mainly due to the restricted access property of HFIP-octanoic acid SUPRAS with reverse micelle aggregates. The absence of matrix effects contributed to the reliable quantitation by external calibration, avoiding the use of expensive isotopically labeled internal standards. The novel SUPRAS-based DLLME method, coupled with HPLC-MS/MS, was applied for determination of target hormones in real urine.