クロセチンは、網膜色素上皮細胞のPDGF-BB誘導の増殖と移動を阻害します

増殖性硝子体網膜症（PVR）では、網膜色素上皮（RPE）細胞の増殖と移動が病因にとって重要です。血小板由来成長因子（PDGF）は、基礎となるメカニズムの重要な要因です。いくつかの研究により、PDGFがPVRのRPE細胞に対する増殖および移動効果を誘導することが示されています。サフランに豊富なクロセチンアナン酸化カロテノイドは、多くの細胞タイプの移動と増殖を抑制することが示されていますが、RPE細胞の移動と増殖に対する効果の研究は不完全です。したがって、我々は、PDGFのアイソフォームであるPDGF-BBによって誘導されるARPE-19細胞の増殖と移動に対するクロセチンの阻害効果を調査しました。細胞の増殖は、細胞カウントKIT-8（CCK-8）および5-エチニル-2'-デオキシリジン（EDU）アッセイによって評価されました。細胞のアポトーシスは、フローサイトメトリー分析によって評価されました。RPE細胞の移動は、トランスウェル移動アッセイとin vitroスクラッチアッセイによって検出されました。アポトーシスの主要な調節タンパク質とPDGF-BB誘発性シグナル伝達経路のレベルは、ウエスタンブロット分析によって決定されました。クロセチン（100-400μm）およびPDGF-BB（20ng/ml）で処理されたARPE-19細胞の増殖と移動は、濃度および時間依存的に有意に阻害されました。クロセチンは、濃度依存的にBcl-2ファミリー調節因子の調節を介して、PDGF-BB誘導ARPE-19細胞のアポトーシスに対する強力な誘導効果を示しました。PDGF-BB誘発性血小板由来成長因子受容体β（PDGFRβ）およびPI3K/AKTおよびERK、P38、JNK活性化の基礎経路に対するクロセチンの阻害効果が同定されました。結果は、クロセチンが、調節シグナル伝達経路のダウンレギュレーションを介したARPE-19細胞のPDGF誘発性増殖と移動の効果的な阻害剤であることを示しました。

In proliferative vitreoretinopathy (PVR), the proliferation and migration of retinal pigment epithelial (RPE) cells are important to pathogenesis. Platelet-derived growth factor (PDGF) is an important factor in the underlying mechanism. Several studies have shown that PDGF induced the proliferation and migration effects on RPE cells in PVR. Crocetin-anantioxidant carotenoid that is abundant in saffron-has been shown to suppress the migration and proliferation of many cell types, but studies of the effects on RPE cell migration and proliferation are incomplete. Therefore, we investigated the inhibitory effect of crocetin on the proliferation and migration of ARPE-19 cells induced by PDGF-BB, an isoform of PDGF. The proliferation of cells was assessed by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) and 5-ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) assays. The apoptosis of cells was assessed by flow cytometric analysis. The migration of RPE cells was detected by a Transwell migration assay and an in vitro scratch assay. The levels of main regulatory proteins for apoptosis and the PDGF-BB-induced signaling pathway were determined by western blot analysis. The proliferation and migration of ARPE-19 cells treated with crocetin (100-400 μM) and PDGF-BB (20 ng/ml) were significantly inhibited in a concentration- and time-dependent manner. Crocetin exhibited potent inducing effects on the apoptosis of PDGF-BB-induced ARPE-19 cells via the modulation of Bcl-2 family regulators in a concentration-dependent manner. The inhibitory effects of crocetin on PDGF-BB-induced platelet-derived growth factor receptor β (PDGFRβ) and the underlying pathways of PI3K/Akt and ERK, p38, JNK activation were identified. The results showed that crocetin is an effective inhibitor of PDGF-BB-induced proliferation and migration of ARPE-19 cell through the downregulation of regulatory signaling pathways.