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Chromosome research : an international journal on the molecular, supramolecular and evolutionary aspects of chromosome biology2018Dec01Vol.26issue(4)

染色体の信頼できる識別と、ATおよびGCに富むヘテロクロマチンの分化を可能にする結合方法を組み合わせた方法

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

存在性のヘテロクロマチン領域は、C陽性染色体領域としての微分染色によって明らかにされます。これらのC陽性バンドは、場所、サイズ、ヌクレオチドの組成によって大きく異なる場合があります。CBGバンディングは、動物の構造ヘテロクロマチンを検出するために最も一般的に使用される方法です。個々の染色体の識別の難しさは、染色体の本体が均一に染色され、Cバンドを超えたバンディングパターンを持たないため、この方法の未解決の問題を表しています。ここでは、微分GTGバンディング後の連続ヘテロクロマチン染色のためにCDAGと呼ばれる方法を提示します。この方法では、Gバンディングに続いて、連続した蛍光染色を伴うホルムアミドの存在下での熱変性が使用されます。この新しい手法は、動物の核型化学における染色体の違いとヘテロクロマチン組成(AT-/GCが豊富)の微小帯域により、ヘテロクロマチンの位置を示す同時に有効です。

存在性のヘテロクロマチン領域は、C陽性染色体領域としての微分染色によって明らかにされます。これらのC陽性バンドは、場所、サイズ、ヌクレオチドの組成によって大きく異なる場合があります。CBGバンディングは、動物の構造ヘテロクロマチンを検出するために最も一般的に使用される方法です。個々の染色体の識別の難しさは、染色体の本体が均一に染色され、Cバンドを超えたバンディングパターンを持たないため、この方法の未解決の問題を表しています。ここでは、微分GTGバンディング後の連続ヘテロクロマチン染色のためにCDAGと呼ばれる方法を提示します。この方法では、Gバンディングに続いて、連続した蛍光染色を伴うホルムアミドの存在下での熱変性が使用されます。この新しい手法は、動物の核型化学における染色体の違いとヘテロクロマチン組成(AT-/GCが豊富)の微小帯域により、ヘテロクロマチンの位置を示す同時に有効です。

Сonstitutive heterochromatin areas are revealed by differential staining as C-positive chromosomal regions. These C-positive bands may greatly vary by location, size, and nucleotide composition. CBG-banding is the most commonly used method to detect structural heterochromatin in animals. The difficulty in identification of individual chromosomes represents an unresolved problem of this method as the body of the chromosome is stained uniformly and does not have banding pattern beyond C-bands. Here, we present the method that we called CDAG for sequential heterochromatin staining after differential GTG-banding. The method uses G-banding followed by heat denaturation in the presence of formamide with consecutive fluorochrome staining. The new technique is valid for the concurrent revealing of heterochromatin position due to differential banding of chromosomes and heterochromatin composition (AT-/GC-rich) in animal karyotyping.

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