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背景：フィブリリン-1、トロポエラチン、フィブリン-5、および潜在的な形質転換因子ベータ結合タンパク質-2およびタンパク質-4（LTBP-2およびLTBP-4）は、弾性層（EL）の必須タンパク質です。この研究では、発達と老化を通じて、ブルーチの膜（BM）のELのこれらの各分子を分析しました。 方法：C57BL/6マウス（胚（E）日E12.5、E15.5、およびE18.5、出生後（P）日P1、P4、およびP7およびP3、P6、およびP75週齢）を使用しました。局所化を調査するために、免疫組織化学染色（IH）を実施しました。透過電子顕微鏡（TEM）を使用して、ミクロフィブリルとトロポエラチンの形成を評価しました。mRNA発現は、定量的リアルタイムPCR（QRT-PCR）によって決定されました。 結果：5つのタンパク質はすべて、胚マウスを除き、IHによってBMのELで発現しました。TEMの結果は、トロポエラチンがミクロフィブリルを染色していることを示しました。3週齢から6週齢の間、マイクロフィブリルはより長く厚くなりました。ドルーゼンに対応する豊富な堆積物のため、75週齢の老人マウスのBMのELを評価することは困難でした。各タンパク質のmRNAレベルは、QRT-PCRで示されるように、E15.5からP1日まで劇的に増加し、p3週間にわたってプラトーしました。 結論：結論として、これらの5つのタンパク質は、BMの弾性繊維アセンブリにおそらく関与しています。マウスの3週齢としてBMのELの完全なアセンブリの日付を定義します。
背景：フィブリリン-1、トロポエラチン、フィブリン-5、および潜在的な形質転換因子ベータ結合タンパク質-2およびタンパク質-4（LTBP-2およびLTBP-4）は、弾性層（EL）の必須タンパク質です。この研究では、発達と老化を通じて、ブルーチの膜（BM）のELのこれらの各分子を分析しました。 方法：C57BL/6マウス（胚（E）日E12.5、E15.5、およびE18.5、出生後（P）日P1、P4、およびP7およびP3、P6、およびP75週齢）を使用しました。局所化を調査するために、免疫組織化学染色（IH）を実施しました。透過電子顕微鏡（TEM）を使用して、ミクロフィブリルとトロポエラチンの形成を評価しました。mRNA発現は、定量的リアルタイムPCR（QRT-PCR）によって決定されました。 結果：5つのタンパク質はすべて、胚マウスを除き、IHによってBMのELで発現しました。TEMの結果は、トロポエラチンがミクロフィブリルを染色していることを示しました。3週齢から6週齢の間、マイクロフィブリルはより長く厚くなりました。ドルーゼンに対応する豊富な堆積物のため、75週齢の老人マウスのBMのELを評価することは困難でした。各タンパク質のmRNAレベルは、QRT-PCRで示されるように、E15.5からP1日まで劇的に増加し、p3週間にわたってプラトーしました。 結論：結論として、これらの5つのタンパク質は、BMの弾性繊維アセンブリにおそらく関与しています。マウスの3週齢としてBMのELの完全なアセンブリの日付を定義します。
BACKGROUND: Fibrillin-1, tropoelastin, fibulin-5, and latent transforming growth factor beta-binding protein-2 and protein-4 (LTBP-2 and LTBP-4) are essential proteins for the elastic lamina (EL). In this study, we analyzed each of these molecules in the EL of Bruch's membrane (BM) through development and aging. METHODS: C57BL/6 mice (embryonic (E) days E12.5, E15.5, and E18.5; postnatal (P) days P1, P4, and P7 and P3, P6, and P75 weeks of age) were used. To investigate localization, immunohistochemical staining (IH) was performed. Transmission electron microscopy (TEM) was used to evaluate the formation of microfibrils and tropoelastin. mRNA expression was determined by quantitative real-time PCR (qRT-PCR). RESULTS: All five proteins were expressed in the EL of BM by IH except in embryonic mice. TEM results showed that tropoelastin co-stained with microfibrils. Between 3 and 6 weeks of age, microfibrils became longer and thicker. It was difficult to evaluate the EL of BM in senile mice at 75 weeks of age because of abundant deposits which correspond to drusen. mRNA levels of each protein increased dramatically from E15.5 to P1 days and plateaued by P3 weeks as shown by qRT-PCR. CONCLUSIONS: In conclusion, these five proteins are possibly involved in elastic fiber assembly in BM. We define the date of full assembly of the EL of BM as 3 weeks of age in mice.
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