SAE2は、DNA二本鎖切断でRAD9の蓄積に拮抗し、チェックポイントシグナル伝達を減衰させ、エンド切除を促進します

MRE11-RAD50-XRS2NBS1複合体は、TEL1ATMキナーゼを活性化し、DNA二重鎖切断（DSB）で5'-3 '切除を触媒することにより、DNA損傷応答に重要な役割を果たします。切除を開始するために、MRE11エンドヌクレアーゼは、DSBの5 '鎖がSAE2CTIPによって刺激された反応で端を導きます。ただし、いくつかの顕著な違いが見つかりました。第一に、SAE2Δ細胞は、MRE11-ND細胞よりもジェノトキシンに対してより大きな感度を示します。第二に、SAE2ΔはSGS1Δで合成致死的ですが、MRE11-NDSGS1Δ変異体は生存可能です。第三に、SAE2はTEL1-RAD53CHK2チェックポイントを減衰させ、MRE11ヌクレアーゼとは無関係にDSBSでRAD953BP1の蓄積に拮抗します。SAE2は他のTEL1基質と競合しているため、クロマチンおよびRad53へのRad9結合が減少することを示します。MRE11-ND変異体のDSBSでの持続的なSAE2結合は、EXO1およびDNA2-SGS1を介した切除に対するRad9およびRad53の阻害効果に対抗し、MRE11-NDおよびSAE2Δ変異によって付与されたさまざまな表現型を占めることをお勧めします。まとめて、これらのデータは、DNA損傷チェックポイントを調節することにより、DSBSでのSAE2の切除開始の独立した役割を示しています。

The Mre11-Rad50-Xrs2NBS1 complex plays important roles in the DNA damage response by activating the Tel1ATM kinase and catalyzing 5'-3' resection at DNA double-strand breaks (DSBs). To initiate resection, Mre11 endonuclease nicks the 5' strands at DSB ends in a reaction stimulated by Sae2CtIP Accordingly, Mre11-nuclease deficient (mre11-nd) and sae2Δ mutants are expected to exhibit similar phenotypes; however, we found several notable differences. First, sae2Δ cells exhibit greater sensitivity to genotoxins than mre11-nd cells. Second, sae2Δ is synthetic lethal with sgs1Δ, whereas the mre11-nd sgs1Δ mutant is viable. Third, Sae2 attenuates the Tel1-Rad53CHK2 checkpoint and antagonizes Rad953BP1 accumulation at DSBs independent of Mre11 nuclease. We show that Sae2 competes with other Tel1 substrates, thus reducing Rad9 binding to chromatin and to Rad53. We suggest that persistent Sae2 binding at DSBs in the mre11-nd mutant counteracts the inhibitory effects of Rad9 and Rad53 on Exo1 and Dna2-Sgs1-mediated resection, accounting for the different phenotypes conferred by mre11-nd and sae2Δ mutations. Collectively, these data show a resection initiation independent role for Sae2 at DSBs by modulating the DNA damage checkpoint.