ESPLは病原性に不可欠であり、結核菌のESPE、ESPF、ESPHレベルを安定化します

ESX-1、VII型、分泌システムは、最も成功した細胞内病原体の1つである結核菌の主要な毒性決定因子を表しています。ここでは、遺伝的アプローチとハイスループットアプローチを組み合わせることにより、115アミノ酸のタンパク質であるEsplがESX-1依存性毒性を媒介し、ESPE、ESPF、ESPHタンパク質レベルの安定化に不可欠であることを示します。実際、ESPLノックアウト変異体は細胞内に複製することができず、ESX-1基質を分泌したり、自然サイトカイン産生を刺激したりすることができませんでした。さらに、プロテオーム研究では、野生型株と比較してESPL変異体のESPE、ESPF、およびESPHの量が大幅に減少し、シャペロンとしてのESPLの役割が示唆されました。後者の結論は、ESPLがESPDと相互作用することを発見することによってさらにサポートされました。これは、ESX-1基質とエフェクタータンパク質、ESPAおよびESPCを安定化することが以前に実証されていました。ESPLの喪失は、ESX-1遺伝子の酸化還元感受性転写活性化因子であるWHIB6の結核のダウンレギュレーションにもつながります。全体として、私たちのデータは、ESX-1分泌システムの保存されているものの、保存されているものの、見落とされがちなものの重要性を強調し、病原性と宿主とポソゲンの相互作用においてESPE、ESPF、ESPHが果たす役割を描写し始めます。

The ESX-1, type VII, secretion system represents the major virulence determinant of Mycobacterium tuberculosis, one of the most successful intracellular pathogens. Here, by combining genetic and high-throughput approaches, we show that EspL, a protein of 115 amino acids, is essential for mediating ESX-1-dependent virulence and for stabilization of EspE, EspF and EspH protein levels. Indeed, an espL knock-out mutant was unable to replicate intracellularly, secrete ESX-1 substrates or stimulate innate cytokine production. Moreover, proteomic studies detected greatly reduced amounts of EspE, EspF and EspH in the espL mutant as compared to the wild type strain, suggesting a role for EspL as a chaperone. The latter conclusion was further supported by discovering that EspL interacts with EspD, which was previously demonstrated to stabilize the ESX-1 substrates and effector proteins, EspA and EspC. Loss of EspL also leads to downregulation in M. tuberculosis of WhiB6, a redox-sensitive transcriptional activator of ESX-1 genes. Overall, our data highlight the importance of a so-far overlooked, though conserved, component of the ESX-1 secretion system and begin to delineate the role played by EspE, EspF and EspH in virulence and host-pathogen interaction.