P53大規模なアポトーシス-1（PRIMA-1）の誘導との再活性化は、癌細胞における変異体p53のアミロイド凝集を阻害します

p53変異体は、細胞に蓄積するアミロイド様構造を形成できます。P53大規模なアポトーシス-1（PRIMA-1）およびその主要な活性代謝物である2-メチレン-3-キヌクリジノン（MQ）の誘導との再活性化は、アポトーシスを誘導し、いくつかのP53標的遺伝子を活性化する展開されたP53変異体をネイティブ立体化に回復させることができます。ただし、PRIMA-1がp53凝集体をクリアできるかどうかは不明です。この研究では、PRIMA-1が凝集した変異体p53をネイティブ形態に復元できるかどうかを調査しました。p53変異タンパク質は、WT P53よりもPRIMA-1およびMQ凝集阻害の両方に対してより敏感であることが観察されました。抗アミロイドオリゴマー抗体アッセイの結果は、PRIMA-1が癌細胞における変異体p53凝集蓄積を逆転させることを明らかにしました。変異体p53を含む乳がんおよび卵巣細胞株からの溶解物のサイズ排除クロマトグラフィーは、PRIMA-1がp53凝集体を大幅に減少させることを確認しました。また、MDA-MB-231細胞溶解物が組換えWT P53の中心コアドメインの凝集を「シード」することができることを示し、変異体P53のプリオン様挙動を裏付けています。また、この凝集効果はMQとPRIMA-1によって阻害されたことにも注目しました。この研究は、PRIMA-1がアミロイド状態P53変異体を救助できるという最初の実証を提供します。これは、癌治療としてさらに調査できる戦略です。

p53 mutants can form amyloid-like structures that accumulate in cells. p53 reactivation with induction of massive apoptosis-1 (PRIMA-1) and its primary active metabolite, 2-methylene-3-quinuclidinone (MQ), can restore unfolded p53 mutants to a native conformation that induces apoptosis and activates several p53 target genes. However, whether PRIMA-1 can clear p53 aggregates is unclear. In this study, we investigated whether PRIMA-1 can restore aggregated mutant p53 to a native form. We observed that the p53 mutant protein is more sensitive to both PRIMA-1 and MQ aggregation inhibition than WT p53. The results of anti-amyloid oligomer antibody assays revealed that PRIMA-1 reverses mutant p53 aggregate accumulation in cancer cells. Size-exclusion chromatography of the lysates from mutant p53-containing breast cancer and ovarian cell lines confirmed that PRIMA-1 substantially decreases p53 aggregates. We also show that MDA-MB-231 cell lysates can "seed" aggregation of the central core domain of recombinant WT p53, corroborating the prion-like behavior of mutant p53. We also noted that this aggregation effect was inhibited by MQ and PRIMA-1. This study provides the first demonstration that PRIMA-1 can rescue amyloid-state p53 mutants, a strategy that could be further explored as a cancer treatment.