Loading...
Current protocols in chemical biology2019Mar01Vol.11issue(1)

キナーゼ指向の基質スクリーニング(KIOSS)によるプロテインキナーゼ基質のin vivo同定

,
,
,
,
,
,
文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

タンパク質のリン酸化は、細胞機能の調節において重要な役割を果たします。タンパク質のリン酸化と責任あるキナーゼに関する情報は、細胞内シグナル伝達を理解するために重要です。Kioss(キナーゼ指向の基質スクリーニング)という名前のキナーゼ基質のin vivoスクリーニングの方法が開発されました。このプロトコルは、14-3-3タンパク質、PIN1-WWドメイン、CHEK2-FHAドメインなどのリンタンパク質結合モジュールを生物学的フィルターとして利用して、ハウスキーピングおよび/または/または/または/または/または/または構造タンパク質。HeLa細胞におけるPKA、PKC、MAPK、およびRho-Kinaseの1000を超える基質候補、およびマウス脳スライス培養におけるD1R、NMDAR、Adenosine A2A受容体、PKA、PKC、MAPK、およびRho-KinaseのD1R、NMDAR、Adenosine A2A受容体、PKC、MAPK、およびRho-Kinaseのリン酸化候補者がいます。この方法で特定されました。Kanphosという名前のオンラインデータベース(キナーゼ関連の神経リン無関心)は、これらの研究で特定されたリン酸化信号と、以前に文献で報告されたものを提供します。©2019 by John Wiley&Sons、Inc。

タンパク質のリン酸化は、細胞機能の調節において重要な役割を果たします。タンパク質のリン酸化と責任あるキナーゼに関する情報は、細胞内シグナル伝達を理解するために重要です。Kioss(キナーゼ指向の基質スクリーニング)という名前のキナーゼ基質のin vivoスクリーニングの方法が開発されました。このプロトコルは、14-3-3タンパク質、PIN1-WWドメイン、CHEK2-FHAドメインなどのリンタンパク質結合モジュールを生物学的フィルターとして利用して、ハウスキーピングおよび/または/または/または/または/または/または構造タンパク質。HeLa細胞におけるPKA、PKC、MAPK、およびRho-Kinaseの1000を超える基質候補、およびマウス脳スライス培養におけるD1R、NMDAR、Adenosine A2A受容体、PKA、PKC、MAPK、およびRho-KinaseのD1R、NMDAR、Adenosine A2A受容体、PKC、MAPK、およびRho-Kinaseのリン酸化候補者がいます。この方法で特定されました。Kanphosという名前のオンラインデータベース(キナーゼ関連の神経リン無関心)は、これらの研究で特定されたリン酸化信号と、以前に文献で報告されたものを提供します。©2019 by John Wiley&Sons、Inc。

Protein phosphorylation plays a critical role in the regulation of cellular function. Information on protein phosphorylation and the responsible kinases is important for understanding intracellular signaling. A method for in vivo screening of kinase substrates named KIOSS (kinase-oriented substrate screening) has been developed. This protocol provides a method that utilizes phosphoprotein-binding modules such as 14-3-3 protein, the pin1-WW domain, and the chek2-FHA domain as biological filters to successfully enrich phosphorylated proteins related to intracellular signaling rather than housekeeping and/or structural proteins. More than 1000 substrate candidates for PKA, PKC, MAPK, and Rho-kinase in HeLa cells, as well as phosphorylation downstream of D1R, NMDAR, adenosine A2a receptor, PKA, PKC, MAPK, and Rho-kinase in mouse brain slice cultures have been identified by this method. An online database named KANPHOS (Kinase-Associated Neural Phospho-Signaling) provides the phosphorylation signals identified by these studies, as well as those previously reported in the literature. © 2019 by John Wiley & Sons, Inc.

医師のための臨床サポートサービス

ヒポクラ x マイナビのご紹介

無料会員登録していただくと、さらに便利で効率的な検索が可能になります。

Translated by Google