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Journal of chromatography. A2019Mar29Vol.1589issue()

砂糖アルコールの決定のためのHilic-UHPLC-ELSD法の開発と検証立体異性体および粗グリセリンの生物変換プロセスへのその応用

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Validation Study
概要
Abstract

バイオディーゼルの製造による粗グリセリンの生産の最近の増加は、商業的な問題、市場におけるこの原材料の過剰、およびその絶え間ない切り下げを引き起こし、その使用のための新しい技術が必要になりました。粗グリセリンは、高付加価値化合物の生産のためにバイオテクノロジープロセスで使用できます。この研究では、蒸発性光散乱検出(ELSD)を使用して、親水性相互作用クロマトグラフィー(HILIC)カラムと同時に分析するために、蒸発光散乱検出(ELSD)を使用して、超高性能液体クロマトグラフィー(UHPLC)に基づいた新規でシンプルかつ高速の方法を紹介します。選択された化合物とその可能性のある立体異性体は、商業的に大きな重要性を持ち、バイオテクノロジールートで得ることができます。最適化された条件下では、スレイトール、エリトリトール、アドニトール、キシリトール、アラビトール、イディトール、ソルビトール、マンニトール、ダルシトール、およびボレミトールを同時に15.0分以内に分析できます。異なるカラム温度の使用は、一部の立体異性体の分離中に選択性に到達するための重要なパラメーターでした。回帰方程式は、50.0〜800.0 ngの範囲にわたって良好な線形関係(r> 0.995)を明らかにしました。検出限界(LOD)および定量化(LOQ)は、それぞれ30.0〜45.0 ngと50.0-75.0 ngの範囲でした。hilic-uhplc-elsdメソッドは、各分析物の保持時間(≤0.5%)の点で、アッセイ内実験(≤5.1%)の変動係数(CV%)が低い(CV%)、良好な精度を示しました。精度は、92.3〜107.3%の範囲の平均回収率で確認されました。開発された方法は、日常的な分析によりアクセスしやすく、適切な分析手法を採用しており、異なるクラスの微生物を使用して粗生体融解グリセリンサンプルに存在する糖アルコールの同時分析に適していることが示されています。

バイオディーゼルの製造による粗グリセリンの生産の最近の増加は、商業的な問題、市場におけるこの原材料の過剰、およびその絶え間ない切り下げを引き起こし、その使用のための新しい技術が必要になりました。粗グリセリンは、高付加価値化合物の生産のためにバイオテクノロジープロセスで使用できます。この研究では、蒸発性光散乱検出(ELSD)を使用して、親水性相互作用クロマトグラフィー(HILIC)カラムと同時に分析するために、蒸発光散乱検出(ELSD)を使用して、超高性能液体クロマトグラフィー(UHPLC)に基づいた新規でシンプルかつ高速の方法を紹介します。選択された化合物とその可能性のある立体異性体は、商業的に大きな重要性を持ち、バイオテクノロジールートで得ることができます。最適化された条件下では、スレイトール、エリトリトール、アドニトール、キシリトール、アラビトール、イディトール、ソルビトール、マンニトール、ダルシトール、およびボレミトールを同時に15.0分以内に分析できます。異なるカラム温度の使用は、一部の立体異性体の分離中に選択性に到達するための重要なパラメーターでした。回帰方程式は、50.0〜800.0 ngの範囲にわたって良好な線形関係(r> 0.995)を明らかにしました。検出限界(LOD)および定量化(LOQ)は、それぞれ30.0〜45.0 ngと50.0-75.0 ngの範囲でした。hilic-uhplc-elsdメソッドは、各分析物の保持時間(≤0.5%)の点で、アッセイ内実験(≤5.1%)の変動係数(CV%)が低い(CV%)、良好な精度を示しました。精度は、92.3〜107.3%の範囲の平均回収率で確認されました。開発された方法は、日常的な分析によりアクセスしやすく、適切な分析手法を採用しており、異なるクラスの微生物を使用して粗生体融解グリセリンサンプルに存在する糖アルコールの同時分析に適していることが示されています。

The recent increase in the production of crude glycerin through the manufacture of biodiesel has imputed a commercial issue, the excess of this raw material in the market and its constant devaluation, which resulted in the need for new technologies for its use. Crude glycerin can be used in biotechnological processes for the production of high value-added compounds. This study presents novel, simple and fast methods based on ultra-high performance liquid chromatography (UHPLC) using evaporative light scattering detection (ELSD) for simultaneous analysis of ten sugar alcohols with a hydrophilic interaction chromatography (HILIC) column. The selected compounds and their possible stereoisomers have major commercial importance and they can be obtained by biotechnological routes. Under optimized conditions, threitol, erythritol, adonitol, xylitol, arabitol, iditol, sorbitol, mannitol, dulcitol and volemitol can be analyzed simultaneously within 15.0 min. The use of different column temperatures was a key parameter to reach the selectivity during the separation of some stereoisomers. Regression equations revealed a good linear relationship (R > 0.995) over the range from 50.0 to 800.0 ng. Limits of detection (LOD) and quantification (LOQ) ranged from 30.0 to 45.0 ng and 50.0-75.0 ng, respectively. The HILIC-UHPLC-ELSD methods showed good precision with low coefficient of variation (CV%) for the intra- and inter-assays experiments (≤ 5.1%) and high repeatability in terms of retention times for each analyte (≤ 0.5%). The accuracy was confirmed with an average recovery ranging from 92.3 to 107.3%. The developed methods employ an analytical technique more accessible and suitable for routine analyzes and have shown to be suitable for simultaneous analysis of sugar alcohols present in crude bioconverted glycerin samples using different classes of microorganisms.

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