ヘマトキシリン - エオシン染色された全マウント組織のスライドフリーイメージングは​​、第3調子の生成と3光子蛍光顕微鏡を組み合わせて使用​​して、全マウント組織を染色しました

癌手術中の外科組織の術中縁の評価は、特に外科領域の最小化が重要と見なされるMOHS顕微鏡手術のような組織保存手術の場合に臨床的に重要です。凍結病理は、残りの癌病変の兆候について切除された組織を評価するゴールドスタンダードです。ただし、現在のプロトコルは時間がかかり、労働集約的です。複雑な凍結切片、染色、および従来の白色光学顕微鏡イメージングプロトコルの代わりに、この研究で非線形顕微鏡を使用して、下部微小型顕微鏡検査を使用して、ヘマトキシリン - エオシン染色された全マウント皮膚組織の光学的に切断された組織病理学的イメージングが示されています。提案された方法では、染色の試薬とイメージングのコントラストは、現在の凍結病理学の臨床基準と完全に一致しているため、将来の用途向けの外科組織の術中評価を促進します。画像：汗腺の形態を示すH＆E染色された全マウント皮膚組織のスライドフリーの非線形顕微鏡画像。

Intraoperative margin assessment of surgical tissues during cancer surgery is clinically important, especially in the case of tissue conserving surgery like Mohs micrographic surgery in which minimization of the surgical area is considered crucial. Frozen pathology is the gold standard of assessing excised tissues for signs of remaining cancerous lesions. The current protocol, however, is time-consuming and labor-intensive. Instead of the complex frozen sectioning, staining, and traditional white light microscopy imaging protocol, optically sectioned histopathological imaging of hematoxylin-eosin stained whole-mount skin tissues with a subfemtoliter resolution is demonstrated by using nonlinear microscopy in this study. With our proposed method, the reagents of staining and the contrast of imaging are fully consistent with the current clinical standard of frozen pathology, thus facilitating rapid intraoperative assessment of surgical tissues for future applications. Image: Slide-free nonlinear microscopy imaging of H&E stained whole-mount skin tissue showing the morphology of sweat glands.