走査型電子顕微鏡（SEM）における形態学的分析のために化学乾燥を使用した原核生物および真核生物の調製（SEM）

スキャン電子顕微鏡（SEM）は、個々のタンパク質から細胞、組織、オルガネラ、さらには生物全体に至るまでの生物学的標本の研究に適用された広く利用可能な手法です。このプロトコルは、2つの化学乾燥方法、ヘキサメチルジジラザン（HMDS）とT-ブチルアルコール（TBA）と、SEMを使用した原核生物と真核生物の両方のイメージングへの適用に焦点を当てています。この記事では、3種類の生物の修正、洗浄、脱水、乾燥、マウント、スパッタコート、およびイメージの方法について説明します：シアノバクテリア（Toxifilum mysidocida、Golenkina sp。、および未知のsp。）、Monomorphina属の2つのユグレノイド（M. aenigmaticaおよびM. pseudopyrum）、およびフルーツフライ（Drosophila Melanogaster）。このプロトコルの目的は、形態学的評価のために広範にさまざまな生物に広く適用できる標本の構造、サイズ、および表面特性に関する詳細な情報を取得するための高速で安価で簡単な方法を記述することです。このプロトコルを正常に完了することで、他の人がこれらの手法をシステムに適用することにより、SEMを使用してサンプルを視覚化することができます。

Scanning electron microscopy (SEM) is a widely available technique that has been applied to study biological specimens ranging from individual proteins to cells, tissues, organelles, and even whole organisms. This protocol focuses on two chemical drying methods, hexamethyldisilazane (HMDS) and t-butyl alcohol (TBA), and their application to imaging of both prokaryotic and eukaryotic organisms using SEM. In this article, we describe how to fix, wash, dehydrate, dry, mount, sputter coat, and image three types of organisms: cyanobacteria (Toxifilum mysidocida, Golenkina sp., and an unknown sp.), two euglenoids from the genus Monomorphina (M. aenigmatica and M. pseudopyrum), and the fruit fly (Drosophila melanogaster). The purpose of this protocol is to describe a fast, inexpensive, and simple method to obtain detailed information about the structure, size, and surface characteristics of specimens that can be broadly applied to a large range of organisms for morphological assessment. Successful completion of this protocol will allow others to use SEM to visualize samples by applying these techniques to their system.