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Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)20190101Vol.1925issue()

Seahorse XF96アナライザーを使用したカルシウム刺激ミトコンドリアの生体エネルギーの評価

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

定量的生物エネルギー分析のためのマイクロプレートベースのアッセイと組み合わせた蛍光ベースの酸素センサーの開発により、小さな生物学的材料とタイムリーに複数の実験条件を一度にスクリーニングすることができます。この章では、(a)無傷の細胞の呼吸器および解糖代謝の制御された測定を設計および実行するための詳細なプロトコルと実用的なヒントの概要を説明します。シーホースXFフラックスアナライザーによるミトコンドリアの生体エネルギーの調節。

定量的生物エネルギー分析のためのマイクロプレートベースのアッセイと組み合わせた蛍光ベースの酸素センサーの開発により、小さな生物学的材料とタイムリーに複数の実験条件を一度にスクリーニングすることができます。この章では、(a)無傷の細胞の呼吸器および解糖代謝の制御された測定を設計および実行するための詳細なプロトコルと実用的なヒントの概要を説明します。シーホースXFフラックスアナライザーによるミトコンドリアの生体エネルギーの調節。

The development of fluorescence-based oxygen sensors coupled with microplate-based assays for quantitative bioenergetics analyses enables screening multiple experimental conditions at once with small biological material and in a timely manner. In this chapter, we outline detailed protocols and practical tips to design and perform controlled measurements of (a) respiratory and glycolytic metabolism of intact cells, (b) substrate-dependent respiration in permeabilized cells and isolated mitochondria, and (c) calcium-dependent regulation of mitochondrial bioenergetics with Seahorse XF Flux Analyzers.

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