スペインのアプリコットの木の木材崩壊に関連するPhaeoacremonium venezuelenseの最初の報告

2011年7月、ビニサレム（スペイン、マヨルカ島）の果樹園でアプリコットツリー（Prunus Armeniaca L.）の植物検診状態を評価するための調査が実施されました。菌類の隔離は、40年前のアプリコットの木（Cv。GaltaVermella、ビターアーモンドと日本の梅に二重に編成された）で行われ、枝の崩壊、葉の塩分症、ダイバックを撃ちました。これらの症状は、木の約10％に現れました。枝の交差または縦方向の部分では、キシレム血管の黒い斑点と暗い縞模様が観察されました。症候性枝を収集し、木材切片（長さ10 cm）を切断し、走っている水道水で洗浄し、1.5％次元亜塩酸ナトリウム溶液で1分間表面浸透し、滅菌蒸留水で2回洗浄しました。切片を縦方向に分割し、200リットルの硫酸ストレプトマイシン1を添加した麦芽抽出物寒天（MEA）に小さな変色した組織を播種しました。皿を暗闇の中で25°Cで14〜21日間インキュベートし、すべてのコロニーをジャガイモデキストロース寒天（PDA）に移しました。Phaeoacremonium sp。壊死組織から一貫して分離されました（分離の50％以上）。コロニーが胞子を産生するまで、25°Cで25°Cで25°Cで暗闇の中でPDAおよびMEAで一本の分離株を得て成長させました（3）。コロニーはPDAとMEAの茶色がかったオレンジでした。分生子は短く、時々分岐し、26〜35（平均29）μmの長さでした。フィアリドは末端または外側であり、ほとんどがモノフィアリジックでした。分生子は、ヒアリン、楕円形のエリプソイダルまたは紡錘状エリプエダル、3〜4（平均3.9）μm、幅1〜1.5（平均1.2）μmでした。これらの文字に基づいて、分離株は、summerbのPhaeoacremonium v​​enezuelense L. Mostertとして特定されました。＆CROUS（2,3）。プライマーT1とBT2B（GenBank Accession No. KF765487）を使用して、分離株9.3のベータチューブリン遺伝子の断片のDNA配列決定がP. venezuelense Genbank Accession HQ605026を一致させました。病原性テストは、隔離9.3を使用して実施されました。cvの10年前のアプリコットの木。鍋で栽培されたガルタ・ロッジャは、8 mmのコルクの穴あけで2つの枝で負傷しました。パラフィルムで包まれる前に、2週齢の培養物からの5 mmの菌糸体PDAプラグを傷に入れました。10個のコントロールプラントに、5 mmの非植民地化PDAプラグを接種しました。植物は、25〜30°Cの温室で維持されました。5か月以内に、すべてのファエオアックレモニウムに接続された枝でのシュートは、葉のクロロシスで弱い成長を遂げ、木部血管には黒い縞がありました。接種された植物で発生した血管壊死は、長さ5.5±0.6 cmで、対照植物の壊死よりも有意に大きかった（P <0.01）。対照植物は症状を示しませんでした。真菌は、すべての接種された挿し木の変色した組織から再分離され、コッホの仮定を完成させました。P. venezuelenseは、アルジェリア（1）および南アフリカ（2）のグレープバインの病原体として報告され、私たちの知る限り、これはスペインのアプリコットの木の木材崩壊に関連するP. venezuelenseの最初の報告です。世界。参考文献：（1）A。Berraf-Tebbal et al。フィトパトール。メディター。50：S86、2011。（2）L。Mostert et al。J.クリン。マイクロビオール。43：1752、2005。（3）L。Mostert et al。スタッド。マイコル。54：1、2006。

In July 2011, a survey was conducted to evaluate the phytosanitary status of apricot trees (Prunus armeniaca L.) in an orchard in Binissalem (Mallorca Island, Spain). Fungal isolation was performed on a 40-year-old apricot trees (cv. Galta Vermella, double-grafted onto bitter almond and Japanese plum) showing a collapse of branches, chlorosis of leaves, and shoot dieback. These symptoms appeared in approximately 10% of the trees. Black spots and dark streaking of the xylem vessels were observed in cross- or longitudinal sections of the branches. Symptomatic branches were collected and wood sections (10 cm long) were cut, washed under running tap water, surface-disinfested for 1 min in a 1.5% sodium hypochlorite solution, and washed twice with sterile distilled water. The sections were split longitudinally, and small pieces of discolored tissues were plated onto malt extract agar (MEA) supplemented with 0.5 g liter-1 of streptomycin sulfate. Dishes were incubated at 25°C in the dark for 14 to 21 days, and all colonies were transferred to potato dextrose agar (PDA). A Phaeoacremonium sp. was consistently isolated from necrotic tissues (more than 50% of the isolations). Single conidial isolates were obtained and grown on PDA and MEA in the dark at 25°C for 2 to 3 weeks until colonies produced spores (3). Colonies were brownish orange on PDA and MEA. Conidiophores were short and occasionally branched, and 26 to 35 (avg. 29) μm long. Phialides were terminal or lateral, mostly monophialidic. Conidia were hyaline, oblong-ellipsoidal or fusiform-ellipsoidal, 3 to 4 (avg. 3.9) μm long, and 1 to 1.5 (avg. 1.2) μm wide. Based on these characters, the isolates were identified as Phaeoacremonium venezuelense L. Mostert, Summerb. & Crous (2,3). DNA sequencing of a fragment of the beta-tubulin gene of the isolate 9.3 using primers T1 and Bt2b (GenBank Accession No. KF765487) matched P. venezuelense GenBank accession HQ605026. Pathogenicity tests were conducted using isolate 9.3. Ten 2-year-old apricot trees of cv. Galta Rotja grown in pots were wounded in two branches with a 8-mm cork borer. A 5-mm mycelium PDA plug from a 2-week-old culture was placed in the wound before being wrapped with Parafilm. Ten control plants were inoculated with 5-mm non-colonized PDA plugs. Plants were maintained in a greenhouse at 25 to 30°C. Within 5 months, shoots on all Phaeoacremonium-inoculated branches had weak growth with chlorosis of leaves and there were black streaks in the xylem vessels. The vascular necroses that developed on the inoculated plants were 5.5 ± 0.6 cm long, significantly greater than those on the control plants (P < 0.01). Control plants did not show any symptoms. The fungus was re-isolated from discolored tissue of all inoculated cuttings, completing Koch's postulates. P. venezuelense was reported as a pathogen of grapevines in Algeria (1) and South Africa (2) and, to our knowledge, this is the first report of P. venezuelense associated with wood decay of apricot trees in Spain or any country in the world. References: (1) A. Berraf-Tebbal et al. Phytopathol. Mediterr. 50:S86, 2011. (2) L. Mostert et al. J. Clin. Microbiol. 43:1752, 2005. (3) L. Mostert et al. Stud. Mycol. 54:1, 2006.