シュードモナスsyringae pv alisalensisによって引き起こされたネバダ州の従来および有機栽培のルッコラに関する細菌枯病の最初の報告

2007年、ネバダ州（NV）の1,200 m（4,000フィート）を超える従来の有機生産分野で新鮮な市場でスプリンクラー灌漑の下で栽培されたルッコラ（Eruca Vesicariasubsp。SativaCv。MyWay）で葉の斑点が観察されました。各植栽の約30％が影響を受けました。当初、症状は、葉の両側から見える小さな（直径<2 mm）、角度に浸した水に浸した斑点で構成されていました。斑点は拡大して合体し、角を残したままです。病変は黒から日焼けまでの範囲であり、時にはクロロティックまたは紫色の縁を発達させました。いくつかの病変は、ルッコラの綿毛病の症状に似ていましたが、顕微鏡検査では、病変に関連する胞子形成障害がないことが明らかになりました。症候性葉の切片を顕微鏡で検査したときに、細菌の卵が観察されました。青緑色の蛍光擬似モナドは、3つのルッコラ植え付けからキングの中b寒天上の病変から分離されました。12株（各植え付けから少なくとも3つ）を評価し、シュードモナスsyringae pvの既知の株を評価しました。AlisalensisおよびP. syringae pv。すべてのアッセイでのマクリコラ。細菌株は、レバン陽性、オキシダーゼ陰性、およびアルギニンジヒドラーゼ陰性でした。株はジャガイモのスライスを腐敗させませんでしたが、細菌がレリオットのLopatグループ1に属していることを示すタバコ（Nicotiana Tabacum L.Cv。Sansun）に過敏な反応を誘発しました（2）。これは、脂肪酸メチルエステル（MIS-TSBAバージョン4.10; MIDI、Inc。、Newark、de）の分析によって確認されました。BoxA1Rプライマーを使用した反復細菌配列（Rep-PCR）間のDNAの増幅により、NVルッコラ株とP. syringae PVの同一のバンディングパターンが得られました。カリフォルニアのルッコラのアリサレンシス（1）。コッホの仮定は、ルッコラCVの分離株の病原性を確認することにより完了しました。イタリア語とアストロ。株を栄養寒天上で27°Cで48時間増殖させ、滅菌0.01 Mリン酸緩衝液（pH 7.0）で108 cfu/mlに調整し、2〜3週齢の植物に流出するまでスプレーを接種しました。対照植物に同様に、滅菌リン酸緩衝液を噴霧しました。植物は、霧のチャンバーで2日間、温室のベンチ（24〜26°C）で7日間保持しました。すべての接種されたルッコラ植物の葉に発​​達した元の植物で観察された症状に類似した角病変。さらに、一部の植物は、葉の直径10〜20mmの領域に周囲の片側組織のクロロシスを伴う小さな静脈の黒ずみを発達させました。小さな黒い病変（長さ10 mm）も葉柄で観察されました。症候性組織から再分離された細菌株は、P。syringaepvと同一でした。rep-pcrによるalisalensis。対照植物は症状のないままでした。同様の接種とインキュベーション方法により、NVルッコラ分離株の宿主範囲がP. syringae pvの既知の株の範囲と同一であることが確認されました。alisalensis。ルッコラとP. syringae pv。alisalensis分離株は、ブロッコリー・ラブ（Brassica rapasubsp。Rapacv。Sorento）とオート麦（Avena sativacv。Montezuma）に葉の斑点を引き起こしました。病原性検査が繰り返されました。これは、NVの従来および有機成長したルッコラで観察された葉のスポットがP. syringae pvによって引き起こされたことを確認しています。alisalensis。私たちの知る限り、これはNVのルッコラに関するこの病気の最初の報告です。参考文献：（1）C。T. Bull et al。植物dis。88：1384、2004。（2）R。A. Lelliott。J. Appl。バクテリオール。29：470、1966。

In 2007, leaf spots were observed on arugula (Eruca vesicaria subsp. sativa cv. My Way) grown under sprinkler irrigation for fresh market in conventional and organic production fields located above 1,200 m (4,000 feet) in Nevada (NV). Approximately 30% of each planting was affected. Initially, symptoms consisted of small (<2 mm in diameter), angular, water-soaked spots visible from both sides of the leaf, some of which developed a shot-hole appearance. The spots enlarged and coalesced, remaining angular. Lesions ranged from black to tan, occasionally developing a chlorotic or purple margin. Some lesions resembled symptoms of downy mildew on arugula, but microscopic examination revealed no sporangiophores associated with the lesions. Bacterial ooze was observed when sections of symptomatic leaves were examined microscopically. Blue-green fluorescent pseudomonads were isolated from lesions on King's medium B agar from three arugula plantings. Twelve strains (at least three from each planting) were evaluated along with known strains of Pseudomonas syringae pv. alisalensis and P. syringae pv. maculicola in all assays. Bacterial strains were levan positive, oxidase negative, and arginine dihydrolase negative. Strains did not rot potato slices but induced a hypersensitive reaction on tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. Sansun) indicating that the bacteria belonged to Lelliot's LOPAT group 1 (2). This was confirmed by analysis of fatty acid methyl esters (MIS-TSBA version 4.10; MIDI, Inc., Newark, DE), which indicated that the strains were highly similar (similarity >0.80) to P. syringae. Amplification of DNA between repetitive bacterial sequences (rep-PCR) using the BOXA1R primer resulted in identical banding patterns for the NV arugula strains and P. syringae pv. alisalensis from arugula in California (1). Koch's postulates were completed by confirming pathogenicity of the isolated strains on the arugula cvs. Italian and Astro. Strains were grown on nutrient agar for 48 h at 27°C, adjusted to 108 CFU/ml in sterile 0.01 M phosphate buffer (pH 7.0), and spray inoculated until runoff onto 2- to 3-week-old plants. Control plants were similarly sprayed with sterile phosphate buffer. Plants were held for 2 days in a mist chamber and 7 days on a greenhouse bench (24 to 26°C). Angular lesions similar to symptoms observed on the original plants developed on leaves of all inoculated arugula plants. In addition, some plants developed blackening of the smaller veins accompanied by chlorosis of the surrounding interveinal tissue in 10- to 20-mm diameter areas of the leaves. Small black lesions (as much as 10 mm long) were also observed on the petioles. Bacterial strains reisolated from the symptomatic tissue were identical to P. syringae pv. alisalensis by rep-PCR. Control plants remained symptomless. Similar inoculation and incubation methods confirmed that the host range of the NV arugula isolates was identical to that of known strains of P. syringae pv. alisalensis. The arugula and P. syringae pv. alisalensis isolates caused leaf spots on broccoli raab (Brassica rapa subsp. rapa cv. Sorento) and oats (Avena sativa cv. Montezuma). Pathogenicity tests were repeated. This confirms that the leaf spot observed on conventionally and organically grown arugula in NV was caused by P. syringae pv. alisalensis. To our knowledge, this is the first report of this disease on arugula in NV. References: (1) C. T. Bull et al. Plant Dis. 88:1384, 2004. (2) R. A. Lelliott. J. Appl. Bacteriol. 29:470, 1966.