まれなタイプ1様および2型様カルレトリン変異体は、マウスの一般的な1型および2変異体として同様の骨髄増殖性腫瘍を誘導します

カルレティクリン（CALR）遺伝子のフレームシフト変異は、本質的な血栓性腫系および骨髄線維症患者の30％に存在します。最も頻繁な2つの突然変異は、CALR DEL52（タイプ1、約60％）とCALR INS5（タイプ2、約30％）ですが、CALR変異の2％未満でそれぞれ他の多くのまれな変異が占めています。それらのほとんどは、残留野生型カルシウム結合モチーフの欠如または存在とアルファヘリックス構造の修飾に応じて、タイプ1様およびタイプ2様CALR変異として構造的に分類されています。しかし、いくつかの重要な質問は未回答のままであり、特にこれらの他の変異のこのような低頻度の理由です。タイプ1様CALR変異とタイプ2様CALR変異とDEL52とINS5の間の特定の病原性の違いを調査するために、細胞株の2つのタイプ1様（DEL34およびDEL46）と1つのタイプ2様（DEL19）変異をモデル化しました。マウスで。すべてのCALR変異体は、トロンボポエチン受容体（MPL）の存在下で同様の方法でJAK2およびSTAT5/3/1を構成的に活性化し、サイトカイン非依存性の細胞増殖を誘導しましたが、まれな変異体ではより低い程度はありません。これは、DEL52およびINS5と比較して、まれなCALR変異体の発現レベルの低下と相関しています。異なるCALR変異を形質導入した骨髄で染色された致死的に照射されたマウスは、血小板症を発症しましたが、INS5および2型様CALR変異によりはるかに少ない程度はありませんでした。2型様マウスとは対照的に、1型型マウスは、生着後10か月後に顕著な骨髄線維症と脾腫を発症しました。DEL52と同様に、1型様CALR変異は、INS5および2型様突然変異と比較して、造血の初期段階で拡大を誘発しました。したがって、タイプ1様および2型様CALR変異体は、それぞれDEL52およびINS5変異体にそれぞれ構造的および機能的に似ています。

Frameshift mutations in the calreticulin (CALR) gene are present in 30% of essential thrombocythemia and myelofibrosis patients. The two most frequent mutations are CALR del52 (type 1, approximately 60%) and CALR ins5 (type 2, around 30%), but many other rarer mutations exist accounting each for less than 2% of all CALR mutations. Most of them are structurally classified as type 1-like and type 2-like CALR mutations according to the absence or presence of a residual wild-type calcium-binding motif and the modification of the alpha-helix structure. Yet, several key questions remain unanswered, especially the reason of such low frequencies of these other mutations. In an attempt to investigate specific pathogenic differences between type 1-like and type 2-like CALR mutations and del52 and ins5, we modeled two type 1-like (del34 and del46) and one type 2-like (del19) mutations in cell lines and in mice. All CALR mutants constitutively activate JAK2 and STAT5/3/1 in a similar way in the presence of the thrombopoietin receptor (MPL) and induced cytokine-independent cell growth but to a lesser extent with rare mutants over time. This correlates with reduced expression levels of rare CALR mutants compared to del52 and ins5. Lethally irradiated mice that were engrafted with bone marrow transduced with the different CALR mutations developed thrombocytosis, but to a much lesser extent with ins5 and the type 2-like CALR mutation. In contrast to type 2-like mice, type 1-like mice developed marked myelofibrosis and splenomegaly 10 months after engraftment. Similar to del52, type 1-like CALR mutations induced an expansion at an early stage of hematopoiesis compared to ins5 and type 2-like mutation. Thus, type 1-like and type 2-like CALR mutants structurally and functionally resemble del52 and ins5 mutants, respectively.