スプライス補正剤としてのオリゴヌクレオチドパラデシクルコンジュゲート

2'-O-Methylriboホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、5'-Terminiにシクロパラデートベンジルアミンコンジュゲート基に組み込まれており、指定された標的配列でハイブリダイズする能力は、従来のUV融解実験によって評価されました。オリゴヌクレオチドは、ヒト子宮頸がん（Hela LUC/705）、ヒト肝臓（HUH7_705）、およびヒト骨肉腫（U-2 OS_705）レポーター細胞株のスプライススイッチング実験でさらに検査されました。修飾されたオリゴヌクレオチドによって形成された二重鎖の融解温度は、それぞれの未修飾の二重鎖の融解温度よりも約5°C低かった。シクロパラード化されたオリゴヌクレオチドは、ヘラLUC/705細胞株のスプライス補正剤として機能し、変更されていないカウンターパートよりも幾分効率的に機能しました。さらに、この化学修飾の導入は、細胞の毒性を誘発しませんでした。これらの結果は、共有結合した金属化オリゴヌクレオチドを治療薬として使用する可能性を示しています。

2'-O-Methylribo phosphorothioate oligonucleotides incorporating cyclopalladated benzylamine conjugate groups at their 5'-termini have been prepared and their ability to hybridize with a designated target sequence was assessed by conventional UV melting experiments. The oligonucleotides were further examined in splice-switching experiments in human cervical cancer (HeLa Luc/705), human liver (HuH7_705), and human osteosarcoma (U-2 OS_705) reporter cell lines. Melting temperatures of duplexes formed by the modified oligonucleotides were approximately 5 °C lower than melting temperatures of the respective unmodified duplexes. The cyclopalladated oligonucleotides functioned as splice-correcting agents in the HeLa Luc/705 cell line somewhat more efficiently than their unmodified counterparts. Furthermore, the introduction of this chemical modification did not induce toxicity in cells. These results demonstrate the feasibility of using covalently metalated oligonucleotides as therapeutic agents.