ヒト単核食細胞のリガンドの価数72 kd高親和性IgG Fc受容体は1つです

ヒト単核食細胞に存在する72 kDの高親和性IgG FCRのリガンドの価数を評価しました。高親和性FCRが125-IGG1カッパと非標識IgG1ラムダ、または125I-IGG1ラムダと非標識IgG1カッパで同等の量の125-IGG1カッパで飽和していたU937細胞の溶解物を、セファロース - 抗KAPPAとインキュベートしました。適用された125-IGG1カッパの89％が拘束されましたが、適用された125I-IGG1ラムダ結合の0.35％（2つの実験の平均）は、受容体がリガンドで占有されている場合、受容体は1つのリガンド分子のみを結合することを示しています。時間。受容体がリガンド占領下であることを示すために、2つの実験が行われました。最初に、72 kd FCR（FCRMAB32）に向けられたモノクローナル抗体を、等量の125-IGG1ラムダとIgG1カッパで飽和させたU937細胞の溶解物に加えました。この抗FCR抗体は、抗カッパ免疫吸着剤に結合した125-IGG1ラムダの量の用量依存性の7倍の増加を引き起こしました（おそらく、IgG1 kappaを有する受容体を持つ125-IGG1ラムダを伴う架橋受容体によって）。MMAおよびIV3）は、U937で他の2つの決定要因に向けられたもので、そのような増加は発生しませんでした。2番目の実験では、セファロース-FCRMAB32は125-IGG1カッパの60％と125-IGG1ラムダの46％をU937ライセート（高親和性FCRを搭載）に吸着しましたが、125I-IGG1カッパと6の3％のみが吸着しました。K562ライセートに適用された125-IGG1ラムダの％（高親和性FCRがない）に吸着しました。これらのデータを解釈して、洗剤ソリューションでは、U937セル上の高親和性FCRの原子価が1つであることを示します。

The valence for ligand of the 72 kD high-affinity IgG FcR present on human mononuclear phagocytes was evaluated. Lysates of U937 cells whose high-affinity FcR had been saturated with equivalent quantities of 125I-IgG1 kappa and unlabeled IgG1 lambda or with 125I-IgG1 lambda and unlabeled IgG1 kappa were incubated with Sepharose-anti-kappa. Eighty-nine percent of the applied 125I-IgG1 kappa was bound, whereas 0.35% of the applied 125I-IgG1 lambda bound (mean of two experiments), indicating that if the receptors are occupied with ligand, the receptors bind only one ligand molecule at a time. Two experiments were performed to show that the receptors were ligand-occupied. First, a monoclonal antibody directed against the 72 kD FcR (FcRmab32) was added to lysates of U937 cells saturated with equal quantities of 125I-IgG1 lambda and IgG1 kappa. This anti-FcR antibody caused a dose-dependent sevenfold increase in the amount of 125I-IgG1 lambda bound to the anti-kappa immunoadsorbent (presumably by cross-linking receptors bearing 125I-IgG1 lambda with receptors bearing IgG1 kappa), whereas monoclonal antibodies (MMA and IV3) directed against two other determinants on U937 caused no such increase. In the second experiment, Sepharose-FcRmab32 adsorbed 60% of the 125I-IgG1 kappa and 46% of the 125I-IgG1 lambda applied in a U937 lysate (bearing high-affinity FcR), whereas only 3% of 125I-IgG1 kappa and 6% of 125I-IgG1 lambda applied in a K562 lysate (bearing no high-affinity FcR) were adsorbed. We interpret these data to indicate that in detergent solution the valency of the high-affinity FcR on U937 cells is one.