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以前に分離された組換えプラスミドPul720の構造安定性を調べました。Pul720には、12 kbpと6 kbpの4つのECOR1フラグメントを含む23.8 kbpのPBR322の挿入が含まれており、どちらもB. sh btilisゲノムと5 kbpと0.8 kbp（未知の起源）と相同です。アルギニン生合成遺伝子Arga-f-CPAをコードする12 kbpフラグメントは、大腸菌のハイコピーベクターで単独でクローン化することはできませんが、低コピーベクトルPGV1106に挿入してPul800を生成できます。Pul720の欠失分析は、プラスミドの安定性を維持するために5 kbpおよび0.8 kbpの断片が必要ではないことを示しました。6 kbpフラグメントは、pul2030を生成するためにPACYC184のECOR1部位にクローニングされたときに、12 kbpフラグメントまたは不安定性領域を含むサブクローンのPBR322のトランスのクローニングを許可しました。B. subtilis argc-neo転写融合Pul730で決定されたカナマイシンの最小阻害濃度とArgf遺伝子産物の発現、Ornithine Carbamoyltransferase（Octase）は、Arginine過剰の条件下でそれぞれ約3倍および2倍減少しました。PUL2030の存在。B.亜種の部分二倍体は、6 kbpフラグメントを積分ベクトルPJH101に挿入することにより生成されるプラスミドであるPul2100を使用して、親およびアルギニンヒドロキサメート耐性（AHR）変異体を形質転換することにより構築されました。6 kbpフラグメントは、AHRC変異体のオクターゼの親のタイプレベルを補完および復元しました（250語で切り捨てられた要約）
以前に分離された組換えプラスミドPul720の構造安定性を調べました。Pul720には、12 kbpと6 kbpの4つのECOR1フラグメントを含む23.8 kbpのPBR322の挿入が含まれており、どちらもB. sh btilisゲノムと5 kbpと0.8 kbp（未知の起源）と相同です。アルギニン生合成遺伝子Arga-f-CPAをコードする12 kbpフラグメントは、大腸菌のハイコピーベクターで単独でクローン化することはできませんが、低コピーベクトルPGV1106に挿入してPul800を生成できます。Pul720の欠失分析は、プラスミドの安定性を維持するために5 kbpおよび0.8 kbpの断片が必要ではないことを示しました。6 kbpフラグメントは、pul2030を生成するためにPACYC184のECOR1部位にクローニングされたときに、12 kbpフラグメントまたは不安定性領域を含むサブクローンのPBR322のトランスのクローニングを許可しました。B. subtilis argc-neo転写融合Pul730で決定されたカナマイシンの最小阻害濃度とArgf遺伝子産物の発現、Ornithine Carbamoyltransferase（Octase）は、Arginine過剰の条件下でそれぞれ約3倍および2倍減少しました。PUL2030の存在。B.亜種の部分二倍体は、6 kbpフラグメントを積分ベクトルPJH101に挿入することにより生成されるプラスミドであるPul2100を使用して、親およびアルギニンヒドロキサメート耐性（AHR）変異体を形質転換することにより構築されました。6 kbpフラグメントは、AHRC変異体のオクターゼの親のタイプレベルを補完および復元しました（250語で切り捨てられた要約）
The structural stability of a previously isolated recombinant plasmid pUL720 was examined. pUL720 contains an insert in pBR322 of 23.8 kbp comprising 4 EcoR1 fragments of sizes 12 kbp and 6 kbp, both of which are homologous to the B. subtilis genome, and 5 kbp and 0.8 kbp (of unknown origin). The 12 kbp fragment, which encodes the arginine biosynthesis genes argA-F-cpa, cannot be cloned in isolation in a high copy vector in E. coli but can be inserted into a low copy vector pGV1106 to generate pUL800. Deletion analysis of pUL720 indicated that the 5 kbp and 0.8 kbp fragments were not necessary to maintain plasmid stability. The 6 kbp fragment, when cloned into the EcoR1 site in pACYC184 to generate pUL2030, permitted the cloning in trans in pBR322 of the 12 kbp fragment or subclones containing the instability region. The minimum inhibitory concentration of kanamycin determined in the B. subtilis argC-neo transcriptional fusion pUL730 and expression of the argF gene product, ornithine carbamoyltransferase (OCTase), in pUL800 were reduced by approximately 3 and 2 fold respectively under conditions of arginine excess and in the presence of pUL2030. B. subtilis partial diploids were constructed by transforming parental and arginine hydroxamate resistant (Ahr) mutants with pUL2100, a plasmid generated by inserting the 6 kbp fragment into the integration vector pJH101. The 6 kbp fragment complemented and restored parental type levels of OCTase in ahrC mutants.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)
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