バルクアミノ酸検出を介した藻類の総タンパク質分析：O-フタラルデヒド3-メルカプトプロピオン酸（OPA-3MPA）による加水分解後のアミノ酸誘導体化の最適化

藻類バイオマスにおけるタンパク質の分析は、栄養またはその他の高価値アプリケーションのための藻類の特性評価の商業開発の最も重要な分野の1つです。広く実装できる新しい迅速かつ正確な方法が必要であり、複雑な藻類バイオマスマトリックスからの干渉がありません。より労働集約的なアミノHPLC酸分析または特異的でない窒素からタンパク質変換の代替として、酸加水分解藻類バイオマス製剤における一次アミノ酸定量化バルク測定のための単純な分光光度法を開発しました。O-Phthalaldehyde（OPA）ベースの誘導化法を検証しました。これは、標準的な参照アミノ酸と混合物の正確で線形定量化を示し、藻類バイオマスに見られるアミノ酸の複雑さを模倣しています。複雑なバイオマス生化学組成から導出される可能性のある干渉の存在は、メソッド検証段階でテストされました。3-メルカプトプロピオン酸（3MPA）によるOPA誘導体化の新規方法の適用を文書化して、異なる制御された栽培条件から収集され、アミノの参照測定に対して10％以内の精度から10％以内の精度を実証した、収穫された藻類バイオマスの総アミノ酸含有量を決定します。栽培の初期、中期、後期にわたる少なくとも4種および10個の藻類バイオマスサンプルの酸含有量。

The analysis of protein in algal biomass is one of the most critical areas of commercial development of algae characterization for nutritional or other high value applications. A new rapid and accurate method is required that can be widely implemented and that is free from interferences from the complex algal biomass matrix. We developed a simple spectrophotometric method for primary amino acid quantification bulk measurement in an acid hydrolyzed algal biomass preparation, as an alternative to the more labor-intensive amino HPLC acid analysis or less specific nitrogen-to-protein conversion. We have validated an O-phthalaldehyde (OPA)-based derivatization method, showing accurate and linear quantification for standard reference amino acids as well as mixtures, mimicking the amino acid complexity found in algal biomass. The presence of interferences that may be derived from the complex biomass biochemical composition was tested during the method validation phase. We document the application of a novel method of OPA derivatization with 3-mercaptopropionic acid (3MPA) to determine the total amino acid content of harvested algal biomass collected from different, controlled cultivation conditions and demonstrated a within 10% accuracy against a reference measurement of amino acid content in at least 4 species and 10 algal biomass samples, across early, mid, and late-stages of cultivation.