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Stem cell reports2019Jun11Vol.12issue(6)

ドメイン2を含む細胞表面マーカー寿司は、ヒトナイーブ多能性幹細胞の確立を促進します

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

最近、従来のHPSCよりも初期の発達段階に関連するナイーブなヒト多能性幹細胞(HPSC)が報告されています。ただし、素朴なHPSCは、生成および認証が困難なままです。ここでは、ドメイン2(SUSD2)を含む寿司が胚とin vitroの素朴なHPSCの堅牢な細胞表面マーカーであることを報告します。SUSD2転写産物は、ヒト胚盤胞および免疫染色の移植前エピブラストに濃縮されており、SUSD2のKLF17陽性のエピブラスト細胞への局在が示されています。SUSD2 mRNAはナイーブHPSCで強く発現していますが、他のHPSCでは無視できます。SUSD2ライブ細胞または固定細胞の免疫染色は、ナイーブと従来のHPSCの明確な識別を提供します。SUSD2染色またはフローサイトメトリーにより、メンテナンス培養における素朴なHPSCの監視、および従来のHPSCまたは体細胞再プログラミングのリセット中の分離と定量化が可能になります。したがって、SUSD2は、ナイーブHPSC表現型の信頼できる識別と精製のための強力な非侵襲的ツールです。

最近、従来のHPSCよりも初期の発達段階に関連するナイーブなヒト多能性幹細胞(HPSC)が報告されています。ただし、素朴なHPSCは、生成および認証が困難なままです。ここでは、ドメイン2(SUSD2)を含む寿司が胚とin vitroの素朴なHPSCの堅牢な細胞表面マーカーであることを報告します。SUSD2転写産物は、ヒト胚盤胞および免疫染色の移植前エピブラストに濃縮されており、SUSD2のKLF17陽性のエピブラスト細胞への局在が示されています。SUSD2 mRNAはナイーブHPSCで強く発現していますが、他のHPSCでは無視できます。SUSD2ライブ細胞または固定細胞の免疫染色は、ナイーブと従来のHPSCの明確な識別を提供します。SUSD2染色またはフローサイトメトリーにより、メンテナンス培養における素朴なHPSCの監視、および従来のHPSCまたは体細胞再プログラミングのリセット中の分離と定量化が可能になります。したがって、SUSD2は、ナイーブHPSC表現型の信頼できる識別と精製のための強力な非侵襲的ツールです。

Recently naive human pluripotent stem cells (hPSCs) have been described that relate to an earlier stage of development than conventional hPSCs. Naive hPSCs remain challenging to generate and authenticate, however. Here we report that Sushi Containing Domain 2 (SUSD2) is a robust cell-surface marker of naive hPSCs in the embryo and in vitro. SUSD2 transcripts are enriched in the pre-implantation epiblast of human blastocysts and immunostaining shows localization of SUSD2 to KLF17-positive epiblast cells. SUSD2 mRNA is strongly expressed in naive hPSCs but is negligible in other hPSCs. SUSD2 immunostaining of live or fixed cells provides unambiguous discrimination of naive versus conventional hPSCs. SUSD2 staining or flow cytometry enable monitoring of naive hPSCs in maintenance culture, and their isolation and quantification during resetting of conventional hPSCs or somatic cell reprogramming. Thus SUSD2 is a powerful non-invasive tool for reliable identification and purification of the naive hPSC phenotype.

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