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培養中の媒体入浴哺乳類細胞からのグルコースの離脱は、成長の停止をもたらし、グルコース調節タンパク質(GRP)と呼ばれる2つのストレスタンパク質(MR約94-100 kDaおよび78-80 kDa)の合成を誘導します。LLC-PK1細胞では、同じ分子量のタンパク質、ドデシル硫酸ポリアクリルアミドゲル電気泳動およびオートラジオグラフィーによってアッセイされ、グルコースを含まない培地で24時間完全に誘導されます。LLC-PK1細胞からのGRPSは、非極性細胞のGRPに対する抗体と交差反応し、その同定を確認します。グルコースは培養細胞のエネルギー産生には必須ではありませんが、リボース5-リン酸およびヌクレオチド生合成には不可欠であるため(Wice etal。J.Biol。Chem。256:7812-7819、1981)、いくつかの前駆体の効果をテストしました。GRPの誘導におけるリボース5リン酸の。グルコースフリー培地に25 mMのフルクトースまたはガラクトースを添加すると、GRPの誘導が抑制されました。ピリミジンリボヌクレオシドウリジンとシチジンは、GRP合成、リボース、プリンリボヌクレオシドグアノシンとアデノシンも部分的に抑制しました。結果は、文献の間接的な証拠と相まって、細胞リボース5-リン酸または関連代謝産物がGRPの発現を調節するという提案につながります。
培養中の媒体入浴哺乳類細胞からのグルコースの離脱は、成長の停止をもたらし、グルコース調節タンパク質(GRP)と呼ばれる2つのストレスタンパク質(MR約94-100 kDaおよび78-80 kDa)の合成を誘導します。LLC-PK1細胞では、同じ分子量のタンパク質、ドデシル硫酸ポリアクリルアミドゲル電気泳動およびオートラジオグラフィーによってアッセイされ、グルコースを含まない培地で24時間完全に誘導されます。LLC-PK1細胞からのGRPSは、非極性細胞のGRPに対する抗体と交差反応し、その同定を確認します。グルコースは培養細胞のエネルギー産生には必須ではありませんが、リボース5-リン酸およびヌクレオチド生合成には不可欠であるため(Wice etal。J.Biol。Chem。256:7812-7819、1981)、いくつかの前駆体の効果をテストしました。GRPの誘導におけるリボース5リン酸の。グルコースフリー培地に25 mMのフルクトースまたはガラクトースを添加すると、GRPの誘導が抑制されました。ピリミジンリボヌクレオシドウリジンとシチジンは、GRP合成、リボース、プリンリボヌクレオシドグアノシンとアデノシンも部分的に抑制しました。結果は、文献の間接的な証拠と相まって、細胞リボース5-リン酸または関連代謝産物がGRPの発現を調節するという提案につながります。
Withdrawal of glucose from the medium bathing mammalian cells in culture results in cessation of growth and induces the synthesis of two stress proteins (Mr approximately 94-100 kDa and 78-80 kDa) that have been termed glucose-regulated proteins (GRPs). In LLC-PK1 cells, proteins of the same molecular weights, assayed by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis and autoradiography, are fully induced by 24 h in glucose-free medium. The GRPs from LLC-PK1 cells cross-react with antibodies to GRPs of nonpolar cells, confirming their identification. Since glucose is not essential for energy production in cultured cells, but is essential for ribose 5-phosphate and nucleotide biosynthesis (Wice et al. J. Biol. Chem. 256: 7812-7819, 1981), we tested the effect of several precursors of ribose 5-phosphate on the induction of GRPs. The addition of 25 mM fructose or galactose to glucose-free medium suppressed the induction of GRPs. The pyrimidine ribonucleosides uridine and cytidine also suppressed GRP synthesis, ribose and the purine ribonucleosides guanosine and adenosine suppressed partially. The results, coupled with indirect evidence in the literature, lead to the suggestion that cell ribose 5-phosphate or a related metabolite regulates the expression of GRPs.
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