アデノシンデアミナーゼADAR-1および-2のAKT依存性リン酸化は、デアミナーゼ活性を阻害する

マウス胸腺ウイルス性癌遺伝子ホモログ（Akt）キナーゼは、リン酸化のためにサイトゾル基質と核基質の両方を標的としています。細胞質基質はアポトーシスとオートファジーまたは代謝およびタンパク質合成の調節と密接に関連していることが知られていますが、核基質はほとんどがよく理解されていません。核Aktの役割をよりよく定義するために、リン酸化Akt基質抗体を使用して白血病細胞株の核溶解物から潜在的なAkt基質が分離され、タンデム質量分析で同定されました。同定されたタンパク質の中には、二本鎖RNAに作用するアデノシンデアミナーゼの主な核アイソフォームであるRNA（ADAR）1P110に作用するアデノシンデアミナーゼがありました。共免疫沈降研究とin vitroキナーゼアッセイにより、AKT -1、-2、および-3はADAR1P110とADAR2の両方と相互作用し、これらのRNAエディターゼをリン酸化することが明らかになりました。Aktリン酸化疑わしい部位の部位指向変異誘発を使用して、AktはそれぞれT738およびT553でADAR1P110とADAR2をそれぞれリン酸化することがわかった。エディターゼ活性。したがって、AKTの活性化は、RNA編集に直接かつ大きな影響を与えます。バベロニ、A。、Focaccia、E.、Piazzi、M.、Raffini、M.、Cesarini、V.、Tomaselli、S。、Orsini、A。、Ratti、S.、Faenza、I.、Cocco、L.、Gallo、A.、Blalock、W。L. Akt依存性リン酸化ADAR-1および-2は、ディアミナーゼ活性を阻害します。

Murine thymoma viral oncogene homolog (AKT) kinases target both cytosolic and nuclear substrates for phosphorylation. Whereas the cytosolic substrates are known to be closely associated with the regulation of apoptosis and autophagy or metabolism and protein synthesis, the nuclear substrates are, for the most part, poorly understood. To better define the role of nuclear AKT, potential AKT substrates were isolated from the nuclear lysates of leukemic cell lines using a phosphorylated AKT substrate antibody and identified in tandem mass spectrometry. Among the proteins identified was adenosine deaminase acting on RNA (ADAR)1p110, the predominant nuclear isoform of the adenosine deaminase acting on double-stranded RNA. Coimmunoprecipitation studies and in vitro kinase assays revealed that AKT-1, -2, and -3 interact with both ADAR1p110 and ADAR2 and phosphorylate these RNA editases. Using site-directed mutagenesis of suspected AKT phosphorylation sites, AKT was found to primarily phosphorylate ADAR1p110 and ADAR2 on T738 and T553, respectively, and overexpression of the phosphomimic mutants ADAR1p110 (T738D) and ADAR2 (T553D) resulted in a 50-100% reduction in editase activity. Thus, activation of AKT has a direct and major impact on RNA editing.-Bavelloni, A., Focaccia, E., Piazzi, M., Raffini, M., Cesarini, V., Tomaselli, S., Orsini, A., Ratti, S., Faenza, I., Cocco, L., Gallo, A., Blalock, W. L. AKT-dependent phosphorylation of the adenosine deaminases ADAR-1 and -2 inhibits deaminase activity.