乳がんにおけるCD56発現は、細胞毒性免疫学的シナプスの形成を促進することにより、自然キラーを介した細胞毒性に対する感受性を誘導します

自然キラー（NK）細胞株の潜在的な値を調べました。NK-92、乳がん（BC）治療のための免疫療法ツールとして、NK-92を介した細胞毒性に対する感受性のバイオマーカーを検索しました。1つの乳房前癌および9つのBC細胞株に対するNK-92細胞の細胞毒性活性を、カルセインAMおよび脱顆粒アッセイを使用して分析しました。NK-92応答性に関連する分子は、RNAシーケンスを使用した微分遺伝子発現分析によって決定され、RT-PCR、免疫染色およびフローサイトメトリーによって検証されました。NKターゲットの相互作用と免疫学的シナプス形成は、蛍光顕微鏡で評価されました。潜在的なバイオマーカーの発現は、99の患者由来BC組織と10の正常な乳腺上皮組織のIHCによって決定されました。ほとんどの（8/9）BC細胞株は耐性があり、紀元前1つだけで、前癌細胞株はNK-92リンパ球によって効果的に殺されました。NK-92感受性標的細胞はCD56を特異的に発現しました。これは、CD56陰性BC細胞での異所性発現がNK-92を介した殺害に対する感受性を誘発し、CD56が応答性のバイオマーカーであるだけでなく、NK機能を積極的に調節することを示唆しています。NK細胞でも発現するCD56接着分子は、免疫学的シナプスで蓄積し、NKターゲット相互作用を促進し、細胞毒性グランザイムB移動NK-92からCD56発現標的細胞への転写、および標的のカスパーゼ3活性化の誘導。興味深いことに、CD56の発現は、正常な乳房組織（80％）と比較して、乳房腫瘍組織（36％）で還元されることがわかった（36％）。CD56は、NK-92細胞ベースの免疫療法に対するBC応答性の潜在的な予測バイオマーカーであり、CD56発現の喪失はNK免疫からの脱出のメカニズムである可能性があります。

We examined the potential value of the natural killer (NK) cell line; NK-92, as immunotherapy tool for breast cancer (BC) treatment and searched for biomarker(s) of sensitivity to NK-92-mediated cytotoxicity. The cytotoxic activity of NK-92 cells towards one breast precancerous and nine BC cell lines was analyzed using calcein-AM and degranulation assays. The molecules associated with NK-92-responsiveness were determined by differential gene expression analysis using RNA-sequencing and validated by RT-PCR, immunostaining and flow cytometry. NK-target interactions and immunological synapse formation were assessed by fluorescence microscopy. Potential biomarker expression was determined by IHC in 99 patient-derived BC tissues and 10 normal mammary epithelial tissues. Most (8/9) BC cell lines were resistant while only one BC and the precancerous cell lines were effectively killed by NK-92 lymphocytes. NK-92-sensitive target cells specifically expressed CD56, which ectopic expression in CD56-negative BC cells induced their sensitivity to NK-92-mediated killing, suggesting that CD56 is not only a biomarker of responsiveness but actively regulates NK function. CD56 adhesion molecules which are also expressed on NK cells accumulate at the immunological synapse enhancing NK-target interactions, cytotoxic granzyme B transfer from NK-92 to CD56-expressing target cells and induction of caspase 3 activation in targets. Interestingly, CD56 expression was found to be reduced in breast tumor tissues (36%) with strong inter- and intratumoral heterogeneity in comparison to normal breast tissues (80%). CD56 is a potential predictive biomarker for BC responsiveness to NK-92-cell based immunotherapy and loss of CD56 expression might be a mechanism of escape from NK-immunity.